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circADAMTS16的表达谱分析及其对牛脂肪细胞分化的影响
引用本文:户春丽,雷召雄,汪书哲,盛 辉,高玉红,马燕芬,马 云.circADAMTS16的表达谱分析及其对牛脂肪细胞分化的影响[J].西北农业学报,2024(2):208-217.
作者姓名:户春丽  雷召雄  汪书哲  盛 辉  高玉红  马燕芬  马 云
作者单位:(宁夏大学 农学院,宁夏回族自治区反刍动物分子细胞育种重点实验室,银川 750021)
基金项目:国家自然科学基金(U22A20506,32072720);宁夏回族自治区重点研发项目(2021BEF01002,2021NXZD1 );自治区科技创新团队计划(03010360052);自治区科技创新领军人才培养项目(2020GKLRLX02)。
摘    要:旨在探究 circADAMTS16在牛不同组织和前体脂肪细胞中的表达水平及其对牛脂肪细胞分化的影响,为进一步研究circRNA在细胞分化和脂肪组织发育过程中的调控作用提供依据。采用组织块法分离培养牛原代前体脂肪细胞并诱导分化,模拟牛脂肪组织生长发育过程;通过qRT-PCR检测 circADAMTS16在牛不同组织(心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脂肪)和脂肪细胞分化不同阶段(0 d、2 d、4 d、8 d、10 d)的表达水平;构建 circADAMTS16的过表达载体(pCD2.1- circADAMTS16),设计合成 circADAMTS16的小干扰RNA (si- circADAMTS16),采用(Lipofectamine3000)转染试剂将pCD2.1- circADAMTS16和si- circADAMTS16转染牛前体脂肪细胞,利用qRT-PCR法检测转染效果,同时检测脂肪分化标志基因PPARγ、C/EBPα和 C/EBPβ的表达量变化,并进行油红O染色,综合分析干扰和过表达 circADAMTS16对牛脂肪细胞分化的影响。结果如下:①qRT-PCR检测结果表明 circADAMTS16在心脏中表达量最高,肝脏次之,脾最低;②在牛原代前体脂肪细胞分化过程中, circADAMTS16在第2天显著高表达,随后逐渐降低,在第8天时达到最低。③在牛前体脂肪细胞中过表达circADAMTST16后,脂肪分化标志基因PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ的表达量显著下降;油红O染色结果显示,过表达后脂滴形成数量明显少于对照组;而干扰 circADAMTS16表达后,脂肪分化标志基因PPARγ和C/EBPα表达量显著上升。综上所述, circADAMTS16对牛原代前体脂肪细胞的分化过程具有显著的调控作用,过表达 circADAMTST16可抑制牛原代前体脂肪细胞分化进程,而干扰 circADAMTS16表达可以促进牛原代前体脂肪细胞分化进程,探明 circADAMTS16对牛原代前体脂肪细胞分化的具体调控作用。

关 键 词:    circADAMTS16  脂肪细胞  载体构建  过表达〖HT〗〖HK〗〖WT6〗

Expression Profile Analysis of circADAMTS16 and Its Effect on Differentiation of Bovine Adipocytes
HU Chunli,LEI Zhaoxiong,WANG Shuzhe,SHENG Hui,GAO Yuhong,MA Yanfen and MA Yun.Expression Profile Analysis of circADAMTS16 and Its Effect on Differentiation of Bovine Adipocytes[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2024(2):208-217.
Authors:HU Chunli  LEI Zhaoxiong  WANG Shuzhe  SHENG Hui  GAO Yuhong  MA Yanfen and MA Yun
Abstract:
Keywords:Cattle    circADAMTS16  Adipocytes  Vector construction  Overexpression
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