| 梨果黑斑病菌磷酸二酯酶PDE基因克隆及其在侵染结构分化中的表达分析 |
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| 引用本文： | 毛仁燕,蒋倩倩,李永才,毕阳,刘勇翔,黄怡,张苗.梨果黑斑病菌磷酸二酯酶PDE基因克隆及其在侵染结构分化中的表达分析[J].核农学报,2022,36(4):728-737. |
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| 作者姓名： | 毛仁燕 蒋倩倩 李永才 毕阳 刘勇翔 黄怡 张苗 |
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| 作者单位： | 甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃 兰州 730070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31860456)； |
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| 摘 要： | 磷酸二酯酶(PDE)能够特异地催化cAMP/cGMP 3', 5'环磷酸的3'环磷酸键水解,调节胞内cAMP水平,进而调控致病真菌的生长发育,但PDE基因在梨果黑斑病菌中的具体调控机制有待研究。本研究采用反转录PCR(RT-PCR)克隆了梨果黑斑病菌Alternaria alternata中的PDEL和PDEH基因;通过TMHMM、ProtScale、SOPMA等在线分析工具对AaPDEL和AaPDEH基因及其编码蛋白进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析了PDEL和PDEH基因在梨果黑斑病菌侵染结构分化过程中的表达特性。克隆得到梨果黑斑病菌PDEL和PDEH,分别命名为AaPDEL和AaPDEH,蛋白编码区(CDS)长度分别为3 132和2 886 bp,分别编码1 043和961个氨基酸。生物信息学分析表明AaPDEL和AaPDEH均属于不稳定亲水蛋白,不含信号肽也无跨膜结构,均具有多个磷酸化位点,分别定位于线粒体和细胞核上;AaPDEL和AaPDEH分别具有Class Ⅱ型和Ⅰ型保守催化结构域。系统分析结果表明,AaPDEL和AaPDEH与小麦褐斑病菌(Pyrenophora tritici-repentis)和番茄匍柄霉(Stemphylium lycopersici)亲缘关系最近,同源性分别高达79.25%和88.80%。qRT-PCR结果显示,疏水性诱导,A. alternata侵染结构分化过程中,AaPDEL和AaPDEH基因在附着胞形成阶段(6 h)表达量显著提高,较萌发初期阶段(2 h)分别上调1.19和1.97倍,表明AaPDEL和AaPDEH在A. alternata侵染结构分化中具有重要的调控作用。本研究为进一步从分子水平揭示PDE调控机制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 梨果黑斑病菌 磷酸二酯酶 生物信息学分析 侵染结构分化 表达特性 |
| 收稿时间： | 2021-04-25 |
Cloning and Expression Analysis of Phosphodiesterase PDE Gene in Infection Structure Differentiation of Alternaria alternata |
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| MAO Renyan,JIANG Qianqian,LI Yongcai,BI Yang,LIU Yongxiang,HUANG Yi,ZHANG Miao.Cloning and Expression Analysis of Phosphodiesterase PDE Gene in Infection Structure Differentiation of Alternaria alternata[J].Acta Agriculturae Nucleatae Sinica,2022,36(4):728-737. |
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| Authors: | MAO Renyan JIANG Qianqian LI Yongcai BI Yang LIU Yongxiang HUANG Yi ZHANG Miao |
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| Institution: | College of Food Science and Engineering, Gansu Agricultural University, Lanzhou, Gansu 730070 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Alternaria alternata phosphodiesterase bioinformatics analysis structure differentiation of infection expression characteristics |
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