| 猪CD8β基因的克隆、表达及其结构与功能分析 |
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| 引用本文： | 王生富,景志忠,陈国华,房永祥,莫斯科,段凤云,何延华.猪CD8β基因的克隆、表达及其结构与功能分析[J].中国预防兽医学报,2008,30(9). |
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| 作者姓名： | 王生富 景志忠 陈国华 房永祥 莫斯科 段凤云 何延华 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃省动物寄生虫病重点实验室/家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃,兰州,730046;甘肃省农业大学,甘肃,兰州,730070
2. 中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃省动物寄生虫病重点实验室/家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃,兰州,730046 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家支撑计划项目 |
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| 摘 要： | 本研究应用RT-PCR技术,从猪胸腺细胞总RNA中扩增、克隆了猪CD8β基因,序列分析表明CD8β含621 bp的开放阅读框,编码207个氨基酸,与NCBI/GeneBank已发表的参考基因的核苷酸及推导氨基酸序列的同源性分别为97.8%和96.8%,与人、小鼠和鸡CD8B蛋白的氨基酸同源性分别为75.7%、67.9%和33.3%.根据大肠杆菌密码子偏嗜性改造目的基因,构建了pET28a/PCD8 β原核表达系统,并经诱导获得高效表达的分子量为24 ku的重组蛋白(rPCD8 β),表达量占菌体蛋白总量的30%.利用生物信息学和分子生物学软件对猪CD8 β基因编码的蛋白进行结构预测,表明猪CD8 β成熟蛋白为跨膜蛋白,其中172aa在胞外区,22aa在跨膜区,10aa在胞内区;蛋白骨架内含有较多的柔性区域,而且分布不均匀.能形成结构松散的球状蛋白;猪CD8 β分子V区三维结构与鼠的具有非常相似的空间结构,与人的差别较大,这为猪CD8B蛋白结构与功能的进一步研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 猪CD8β基因 克隆 表达 结构预测 |
Cloning ,expression and structure and function analysis of porcine CD8 β gene |
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| WANG Sheng-fu,JING Zhi-zhong,CHEN Guo-hua,FANG Yong-xiang,MO Si-ke,DUAN Feng-yun,HE Yan-hua.Cloning ,expression and structure and function analysis of porcine CD8 β gene[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(9). |
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| Authors: | WANG Sheng-fu JING Zhi-zhong CHEN Guo-hua FANG Yong-xiang MO Si-ke DUAN Feng-yun HE Yan-hua |
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