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弹性蛋白酶产生菌的筛选及其发酵条件的初步研究
引用本文:陈启和,何国庆,邬应龙.弹性蛋白酶产生菌的筛选及其发酵条件的初步研究[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2003,29(1):59-64.
作者姓名:陈启和  何国庆  邬应龙
作者单位:浙江大学,食品科学与营养系,浙江,杭州,310029
基金项目:浙江省自然科学基金资助项目(300024)
摘    要:从肉联厂和屠宰场附近的土壤和污水中采集到的近100个样品中,经富集培养分离到123株能产生弹性蛋白酶的菌株,反复初筛、复筛后,分离到一株产胞外弹性蛋白酶活较高且稳定的细菌,经初步鉴定属芽孢杆菌属(Bacillus sp. EL3).同时研究了其产酶最适条件, 产酶最适碳源为葡萄糖, 最适氮源为豆饼粉.并对碳源、氮源和生长因子进行了正交实验,研究发现碳源对产酶的影响最大,其次为氮源.当葡萄糖的用量为6%、豆饼粉为5%、玉米提取液为0.2%时,其具有较高的产酶水平.最适发酵初始pH为7.5 , 250 mL 最适摇瓶装液量为20 mL.在该发酵培养基中培养,35 h时达最高的产酶水平.同时还对离心后的粗酶液进行温度和pH试验, 发现该酶最适作用温度和pH分别为50 ℃和7.4, 该酶在40 ℃以下保温30 min酶活仍较高, 在60 ℃以上酶活全部丧失.在pH7.4~9.0的范围内比较稳定, 而在pH 7.0以下时, 酶活下降很快.金属离子Cu2+、Zn2+、Al3+能抑制弹性蛋白酶的活性,而Fe3+、Li2+能激活弹性蛋白酶活性,螯合剂EDTA则严重抑制弹性蛋白酶活性.

关 键 词:弹性蛋白酶  芽孢杆菌  筛选  鉴定  产酶条件  酶性质
文章编号:1008-9209(2003)01-0059-06

Screening of elastase-producing strains and primariry atudies on fermentation conditions
Abstract:
Keywords:elastase  Bacillus sp  EL3  screening  identification  elastase production  condition  crude enzyme properties
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