| 敖汉细毛羊DKK1基因重组质粒的构建及其在成纤维细胞中表达量的研究 |
| |
| 引用本文： | 张梦瑶,杨峰,刘开东,程明,王国义,刘积凤,柳楠,贺建宁.敖汉细毛羊DKK1基因重组质粒的构建及其在成纤维细胞中表达量的研究[J].中国畜牧兽医,2018(1). |
| |
| 作者姓名： | 张梦瑶 杨峰 刘开东 程明 王国义 刘积凤 柳楠 贺建宁 |
| |
| 作者单位： | 青岛农业大学动物科技学院;青岛畜牧兽医研究所;赤峰市敖汉旗种羊场; |
| |
| 摘 要： | 本研究旨在构建敖汉细毛羊DKK1基因的重组质粒,并对其转染成纤维细胞后基因的表达量变化进行研究。试验采集敖汉细毛羊肱二头肌提取基因组DNA,参照GenBank中DKK1基因序列设计1对引物,PCR扩增获得DKK1基因片段,连接到pEASYTM-T1载体,构建pEASYTM-T1-DKK1重组质粒并转化大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态细胞,提取质粒进行酶切鉴定,鉴定正确后构建PmaxGFP-DKK1重组质粒,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态细胞;对敖汉细毛羊的成纤维细胞进行分离培养,并将构建的重组质粒PmaxGFP-DKK1转染成纤维细胞,利用实时荧光定量PCR技术检测DKK1基因在成纤维细胞中的表达量变化。结果显示,经酶切、测序鉴定发现,重组质粒PmaxGFP-DKK1构建成功,大小为3 956bp,并成功瞬时转染成纤维细胞,转染细胞后DKK1基因的表达量明显升高,且转染组的表达量极显著高于对照组(P0.01)。试验成功构建了敖汉细毛羊DKK1基因重组质粒,并成功转染成纤维细胞,为进一步研究DKK1基因的功能奠定基础。
|
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
