| 牛肺炎链球菌重组PsaA蛋白对牛胚气管上皮细胞黏附抑制作用的研究 |
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| 引用本文： | 孙雅婕,郭婷,周雅坪,赵红梅,赵逢淼,高源,李梦思,郝永清.牛肺炎链球菌重组PsaA蛋白对牛胚气管上皮细胞黏附抑制作用的研究[J].中国预防兽医学报,2024(2):195-200. |
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| 作者姓名： | 孙雅婕 郭婷 周雅坪 赵红梅 赵逢淼 高源 李梦思 郝永清 |
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| 作者单位： | 内蒙古农业大学兽医微生物学与免疫学实验室 |
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| 摘 要： | 为研究牛肺炎链球菌的黏附蛋白—肺炎链球菌表面黏附素A (PsaA)对牛肺炎链球菌黏附牛胚气管上皮细胞的影响，本研究利用PCR扩增牛肺炎链球菌psaA基因，构建重组质粒pET32a-PsaA，经双酶切和测序鉴定正确后，将阳性重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞后进行IPTG诱导表达，采用SDS-PAGE和western blot鉴定重组PsaA蛋白(rPsaA)的表达情况及反应原性，结果显示，rPsaA在上清和沉淀中均获得了表达，且具有较好的反应原性。将牛胚气管上皮细胞与1.3×108cfu/mL的牛肺炎链球菌稀释液于37℃共孵育后，利用间接免疫荧光试验(IFA)检测牛肺炎链球菌对牛胚气管上皮细胞的黏附性，结果显示，可观察到黏附在牛胚气管上皮细胞的牛肺炎链球菌的绿色荧光，即牛肺炎链球菌可以黏附牛胚气管上皮细胞。利用牛肺炎链球菌稀释液孵育经不同浓度rPsaA预处理的牛胚气管上皮细胞后，对黏附的细菌计数，结果显示，rPsaA可以极显著减少牛肺炎链球菌对牛胚气管上皮细胞的黏附菌数(P<0.01)。利用本研究制备的rPsaA多克隆抗体和肺炎链球菌阳性血清分别与牛肺...
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| 关 键 词： | 肺炎链球菌 psaA基因 原核表达 黏附 |
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