| Annexin A2基因敲除MDCK细胞系的构建 |
| |
| 引用本文： | 黄静,高洁,夏苏苏,金志颖,康琳,高姗,杨浩,辛文文,赵宝华,王景林.Annexin A2基因敲除MDCK细胞系的构建[J].动物医学进展,2019,40(5):13-17. |
| |
| 作者姓名： | 黄静 高洁 夏苏苏 金志颖 康琳 高姗 杨浩 辛文文 赵宝华 王景林 |
| |
| 作者单位： | 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京 100071;河北师范大学,河北石家庄 050024;军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京 100071;河北师范大学,河北石家庄,050024 |
| |
| 摘 要： | 应用Crispr/Cas9基因编辑技术敲除MDCK细胞中的Annexin A2基因,并验证其是否为ε毒素在MDCK细胞表面的受体。根据Crispr/Cas9靶点设计原则设计靶点,构建PALentiCRISPR v2重组质粒。借助Crispr/Cas9技术,将构建好的质粒转染至MDCK细胞中,用嘌呤霉素筛选敲除Annexin A2蛋白的MDCK细胞株,并通过测序和Western blot验证敲除效果。通过细胞毒性试验验证MDCK细胞膜表面的Annexin A2蛋白是否为ε毒素的受体蛋白。测序结果和Western blot结果表明,通过Crispr/Cas9技术成功敲除了MDCK细胞的Annexin A2基因,但细胞毒性试验结果表明,敲除Annexin A2基因并不能减弱ε毒素对MDCK细胞的毒性。结果表明,Annexin A2蛋白不是ε毒素在MDCK细胞表面的受体,研究结果为今后MDCK细胞其他蛋白的敲除提供了试验方法,构建的Annexin A2基因敲除的MDCK细胞也为Annexin A2蛋白引起的其他疾病的研究奠定了基础。
|
| 关 键 词： | Crispr/Cas9技术 基因敲除 ANNEXIN A2 MDCK细胞系 |
Construction of Annexin A2 Gene Knockout in MDCK Cell Line |
| |
| HUANG Jing,GAO Jie,XIA Su-su,JIN Zhi-ying,KANG Lin,GAO Shan,YANG Hao,XIN Wen-wen,ZHAO Bao-hua,WANG Jing-lin.Construction of Annexin A2 Gene Knockout in MDCK Cell Line[J].Progress In Veterinary Medicine,2019,40(5):13-17. |
| |
| Authors: | HUANG Jing GAO Jie XIA Su-su JIN Zhi-ying KANG Lin GAO Shan YANG Hao XIN Wen-wen ZHAO Bao-hua WANG Jing-lin |
| |
| Institution: | (State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity,Institute of Microbiology and Epidemiology,AMMS,Beijing,100071,China;Life Science Institute of Hebei Normal University,Shijiazhuang,Hebei,050024,China) |
| |
| Abstract: | HUANG Jing;GAO Jie;XIA Su-su;JIN Zhi-ying;KANG Lin;GAO Shan;YANG Hao;XIN Wen-wen;ZHAO Bao-hua;WANG Jing-lin(State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity,Institute of Microbiology and Epidemiology,AMMS,Beijing,100071,China;Life Science Institute of Hebei Normal University,Shijiazhuang,Hebei,050024,China) |
| |
| Keywords: | Crisper/Cas9 system gene knockout Annexin A2 MDCK cell line |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
