| Neuritin条件性基因打靶载体的构建和同源重组胚胎干细胞克隆鉴定 |
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| 引用本文： | 孙筱品,董玉梅,汪海燕,谌容,桂飞,宋晓明,汪朦,杨怡,谭晓华,洪玉,宋杨,黄瑾,杨磊.Neuritin条件性基因打靶载体的构建和同源重组胚胎干细胞克隆鉴定[J].动物医学进展,2019,40(4):16-21. |
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| 作者姓名： | 孙筱品 董玉梅 汪海燕 谌容 桂飞 宋晓明 汪朦 杨怡 谭晓华 洪玉 宋杨 黄瑾 杨磊 |
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| 作者单位： | 石河子大学 ,新疆石河子,832002;杭州师范大学 ,浙江杭州,310036 |
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| 基金项目： | 杭州市重大科技创新项目 |
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| 摘 要： | Neuritin(Nrn1)是神经营养因子家族的成员,能够维持神经元的存活和突起的生长,在神经系统发育和再生中起重要作用。为了解Neuritin基因在整体动物水平的系统生物学功能,通过PCR扩增Neuritin基因片段,将该片段用In-fusion无缝克隆技术连接至用限制性内切酶Asc1酶切后线性化的CTVIRES-EGFP质粒,转化至Stellar感受态细胞后,对酶切和测序鉴定正确的阳性克隆子进行大量提取质粒,酶切使之线性化后将其电转导入小鼠胚胎干细胞细胞,经G418筛选,挑取抗性克隆,用PCR方法鉴定出同源重组的ES细胞DNA。结果表明,成功构建了CTV-Nrn1-IRES-EGFP基因打靶载体载体并筛选出阳性同源重组胚胎干细胞,为制备Neuritin条件性基因打靶小鼠模型奠定了实验基础。
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| 关 键 词： | NEURITIN 载体构建 基因打靶 胚胎干细胞 |
Construction of Conditioned Neuritin Gene Targeting Vector and Identification of Homologously Recombinant Clone of Embryonic Stem Cells |
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| SUN Xiao-pin,DONG Yu-mei,WANG Hai-yan,CHEN Rong,GUI Fei,SONG Xiao-ming,WANG Meng,YANG Yi,TAN Xiao-hua,HONG Yu,SONG Yang,HUANG Jin,YANG Lei.Construction of Conditioned Neuritin Gene Targeting Vector and Identification of Homologously Recombinant Clone of Embryonic Stem Cells[J].Progress In Veterinary Medicine,2019,40(4):16-21. |
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| Authors: | SUN Xiao-pin DONG Yu-mei WANG Hai-yan CHEN Rong GUI Fei SONG Xiao-ming WANG Meng YANG Yi TAN Xiao-hua HONG Yu SONG Yang HUANG Jin YANG Lei |
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| Institution: | (Shihezi University,Shihezi,Xinjiang,832002 China;Hangzhou Normal University,Hangzhou,Zhejiang,310036,China) |
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| Abstract: | SUN Xiao-pin;DONG Yu-mei;WANG Hai-yan;CHEN Rong;GUI Fei;SONG Xiao-ming;WANG Meng;YANG Yi;TAN Xiao-hua;HONG Yu;SONG Yang;HUANG Jin;YANG Lei(Shihezi University,Shihezi,Xinjiang,832002 China;Hangzhou Normal University,Hangzhou,Zhejiang,310036,China) |
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| Keywords: | Neuritin construction of vector gene targeting ES cells |
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