| 基于PEDV ORF3基因的强弱毒株鉴别方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 阚蕊慈,张斌,任玉鹏,岳华.基于PEDV ORF3基因的强弱毒株鉴别方法的建立及初步应用[J].动物医学进展,2019,40(5):1-6. |
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| 作者姓名： | 阚蕊慈 张斌 任玉鹏 岳华 |
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| 作者单位： | 西南民族大学 生命科学与技术学院,四川成都,610041;西南民族大学 生命科学与技术学院,四川成都,610041;西南民族大学 生命科学与技术学院,四川成都,610041;西南民族大学 生命科学与技术学院,四川成都,610041 |
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| 基金项目： | "十三五"国家重点研发计划项目;西南民族大学研究生创新科研项目 |
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| 摘 要： | 为了建立一种快速鉴别PEDV强毒株和弱毒株的RT-PCR方法,针对PEDV ORF3基因设计一对引物,优化其反应体系和退火温度,并测试其特异性和敏感性。结果显示,在退火温度55.2℃,上、下游引物各0.5μL时PCR扩增效果最理想。特异性试验结果显示本方法对9种常见猪病病原的核酸模板均不产生扩增条带;敏感性试验显示该方法的检测下限为T-ORF3IS 272拷贝/μL和T-ORF3VC 14.4拷贝/μL。将本试验建立的RT-PCR法与已建立的双重RT-PCR方法进行比较,结果显示两种方法符合率为99.2%,且本法的实际检出率更高。对120份临床样本检测结果显示,PEDV强弱毒株的阳性率分别为87.18%和84.21%,其中9份样本中同时检出2种PEDV毒株,但并未对检测方法的准确性造成影响。建立了一种基于ORF3基因的RT-PCR检测法,该方法特异性强、灵敏度高,可准确区分PEDV野毒株和弱毒株。
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 ORF3基因 反转录-聚合酶链反应 鉴别诊断 |
Development of RT-RCR Distinguished with Vaccine Strains and Field Strains of PEDV Based on ORF3 Gene |
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| KAN Ru-ci,ZHANG Bin,REN Yu-peng,YUE Hua.Development of RT-RCR Distinguished with Vaccine Strains and Field Strains of PEDV Based on ORF3 Gene[J].Progress In Veterinary Medicine,2019,40(5):1-6. |
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| Authors: | KAN Ru-ci ZHANG Bin REN Yu-peng YUE Hua |
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| Institution: | (College of Life Science and Technology,Southwest University for Nationalities,Chengdu,Sichuan,610041,China) |
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| Abstract: | KAN Ru-ci;ZHANG Bin;REN Yu-peng;YUE Hua(College of Life Science and Technology,Southwest University for Nationalities,Chengdu,Sichuan,610041,China) |
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| Keywords: | PEDV ORF3 gene RT-PCR differential diagnosis |
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