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口蹄疫病毒3B基因的高效表达及其表达产物的反应活性
引用本文:覃健萍,徐维加,陈峰,马静云,谢青梅,刘盛梅,曹永长,毕英佐.口蹄疫病毒3B基因的高效表达及其表达产物的反应活性[J].中国兽医科技,2007,37(10):867-872.
作者姓名:覃健萍  徐维加  陈峰  马静云  谢青梅  刘盛梅  曹永长  毕英佐
作者单位:[1]华南农业大学动物科学学院,广东广州510640 [2]云南出入境检验检疫局,云南昆明650228 [3]广东温氏食品集团有限公司,广东新兴527439
基金项目:广东省重大科技专项(2004A2090102)
摘    要:通过PCR技术获得口蹄疫病毒非结构蛋白3B基因,将其克隆至质粒pET-32a(+)和高效可溶性表达质粒pEM中,经PCR筛选,获得阳性重组子pET-3B和pEM-3B,将它们转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,SDS-PAGE及Western-blot检测结果证明,表达的3B融合蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。蛋白可溶性分析表明,EM-3B融合蛋白绝大部分以可溶形式表达。以此可溶性融合蛋白EM-3B为抗原建立了可区分FMD免疫动物和感染动物的EM-3B-DIVA-ELISA方法,经检测,其特异性为95.0%,敏感性为97.5%,与2个国产试剂盒的符合率分别为96.25%和98.75%。

关 键 词:口蹄疫病毒  3B基因  高效可溶性表达  鉴别诊断ELISA
文章编号:1673-4696(2007)10-0867-06
收稿时间:2007-05-08
修稿时间:2007-09-26

High expression of foot-and-mouth disease virus 3B gene and reactivity of the expressed protein
QIN Jian-ping ,XU Wei-jia ,CHEN Feng ,MA Jing-yun ,XIE Qing-mei, LIU Sheng-mei , CAO Yong-chang , BI Ying-zuo.High expression of foot-and-mouth disease virus 3B gene and reactivity of the expressed protein[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2007,37(10):867-872.
Authors:QIN Jian-ping  XU Wei-jia  CHEN Feng  MA Jing-yun  XIE Qing-mei  LIU Sheng-mei  CAO Yong-chang  BI Ying-zuo
Abstract:
Keywords:foot-and-mouth disease virus  3B gene  solution expression with high efficiency  DIVA-ELISA
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