| 虾肝肠胞虫Taqman荧光PCR方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 张娜,谢艳辉,陈进会,李家侨,斯泽恩,黄磊.虾肝肠胞虫Taqman荧光PCR方法的建立与应用[J].中国动物检疫,2017,34(10):98-103. |
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| 作者姓名： | 张娜 谢艳辉 陈进会 李家侨 斯泽恩 黄磊 |
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| 基金项目： | 广东出入境检验检疫局科技计划项目（2015GDK04、2016GDK51、2017GDK04） |
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| 摘 要： | 为给虾肝肠胞虫(EHP)的监测和控制工作提供特异、灵敏的快速检测方法,针对EHP 18S相关保守序列设计1对特异性引物,优化并建立EHP的Taqman荧光PCR检测方法,同时验证该方法的重复性和敏感性。结果显示:体系扩增的最佳退火温度为60℃,构建好的质粒标准品标准曲线斜率为-3.195,R2为0.991;扩增产物阈值循环数(Ct)与标准模板起始量(X)的关系曲线为-3.195×Log(X)+36.923,扩增效率为105.59。使用所构建方法检测湛江市EHP流行情况,同时对样品进行白斑综合症病毒(WSSV)、传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)、桃拉综合征病毒(TSV)、早期死亡综合症(AHPND)病毒检测。结果显示:样品的WSSV、IHHNV、TSV检测均为阴性;AHPND检出阳性率为10%,EHP为30%,其中1份样品的EHP和AHPND检测同为阳性。本研究建立的EHP荧光PCR方法具有特异、灵敏等优点。该方法及其临床应用数据可为EHP的防控提供技术参考。
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| 关 键 词： | 虾肝肠胞虫 南美白对虾 Taqman荧光PCR |
Establishment and Application of Taqman Fluorescent PCR Method for Detection of Enterocytozoon hepatopenaei |
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