| CDV、CPV、CAV-2及CPIV多重PCR的建立及应用 |
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| 引用本文： | 刘畅,逄春华,刘存,王静,刘琪,梁琳,袁维峰,钱爱东,崔尚金.CDV、CPV、CAV-2及CPIV多重PCR的建立及应用[J].中国动物检疫,2017,34(11):89-93. |
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| 作者姓名： | 刘畅 逄春华 刘存 王静 刘琪 梁琳 袁维峰 钱爱东 崔尚金 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划（2016YFD0501003、2017YFD0500905）；中国农业科学院创新工程项目（ASTIP-IAS-15）；基本科研业务费（2016ywf-yb-12） |
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| 摘 要： | 为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照Gen Bank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立了同时扩增CDV(410 bp)、CPV(253 bp)、CVA-2(655 bp)和CPIV(868 bp)的多重PCR方法。利用建立的多重PCR方法,对CDV、CPV、CAV-2、CPIV、CDV+CPV+CAV-2+CPIV和犬冠状病毒(CCV)的DNA或c DNA模板进行扩增,发现该方法的特异性良好。利用建立的多重PCR方法与单一PCR方法进行敏感性比较,发现两者敏感性相差10倍,证明多重PCR方法敏感性良好。利用该方法对从北京市采集的30份犬病料样品进行检测,发现CDV阳性率为63.33%(19/30)、CPV阳性率为33.33%(10/30)、CAV-2阳性率为6.66%(2/30)、CPIV阳性率为0(0/30)。检测结果证明建立的多重PCR方法可用于临床诊断。
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| 关 键 词： | 多重PCR 犬瘟热病毒 犬细小病毒 犬腺病毒Ⅱ型 犬副流感病毒 |
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