环加氧酶2基因的大肠杆菌表达与纯化 |
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引用本文: | 向阳,王和勇,雷桅,孙敏.环加氧酶2基因的大肠杆菌表达与纯化[J].西南农业大学学报,2008,30(12):121-125. |
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作者姓名: | 向阳 王和勇 雷桅 孙敏 |
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作者单位: | [1]西南大学生命科学学院,重庆400715 [2]三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆400715 [3]同济大学附属上海市肺科医院,上海200433 |
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基金项目: | 上海市自然科学基金(06ZR14093) |
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摘 要: | 通过RT-PCR从肺癌细胞株A549克隆环氧化酶2(cyclooxygenase2,COX-2)基因全长1.8kb,测序结果与已发表的一致;将该片段插入pET32-a(+)载体中,构建原核表达载体pET-32-COX-2,转入BL-21中,IPTG诱导重组融合蛋白his—COX-2表达,SDS-PAGE分析71kD处有特异条带,与理论相符;Western blotting验证为COX-2蛋白;用镍离子螯合柱(Ni—NTA)纯化融合蛋白,获得纯度较高的原核表达蛋白.为其新型抑制剂的研发与抗肿瘤作用蛋白疫苗的研制奠定基础.
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关 键 词: | COX-2 融合蛋白 原核表达 纯化 |
The Expression and Purification of COX-2 in Escherichia coli |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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