| 高通量提取桃树叶片组织基因组DNA的研究 |
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| 引用本文： | 刘航空,王安柱,赵彩平,韩明玉,李金金,李芳.高通量提取桃树叶片组织基因组DNA的研究[J].北方园艺,2015(13):120-125. |
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| 作者姓名： | 刘航空 王安柱 赵彩平 韩明玉 李金金 李芳 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家“863”资助项目，国家园艺实验教学示范中心建设资助项目 |
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| 摘 要： | 以1个桃树杂交后代群体中不同成熟度的桃叶片组织为试材,以商品试剂盒为对照,采用高通量提取DNA的方法,研究了提取试剂、研磨仪使用钢珠大小和震动频率、时间等参数对提取DNA产物产率、质量的影响。结果表明:在常用的CTAB中添加0.3%的抗坏血酸,并提高PVP浓度至4%,NaCl浓度至12%,能有效解决试剂盒提取过程中出现色素及蛋白质、多糖等杂质问题。提取方法和研磨方法优化组合,筛选获得高通量提取不同成熟度桃叶片DNA的方法,表明改良的提取方法采用5mm研磨珠、60s、30次/s或5mm研磨珠、60s、25次/s的研磨预处理,不仅省时省工,适用不同成熟度的桃叶片组织,而且提取效果最好,产率最高,质量符合基因组测序要求。该研究为高效提取DNA提供了技术依据。
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| 关 键 词： | 桃树 叶片 高通量 基因组DNA |
Study on Extracting DNA From Peach Leaves Efficiently |
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