| 人雌激素相关受体α配体结合域的原核表达载体构建·表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 王燕飞,黄志伟.人雌激素相关受体α配体结合域的原核表达载体构建·表达及鉴定[J].安徽农业科学,2008,36(23). |
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| 作者姓名： | 王燕飞 黄志伟 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院华南植物园,广东广州,510650;中国科学院广州生物医药与健康研究院,广东广州,510663;中国科学院研究生院,北京,100049
2. 中国科学院广州生物医药与健康研究院,广东广州,510663 |
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| 摘 要： | 目的]构建含人雌激素相关受体α配体结合域区段的原核表达载体,并在大肠杆菌表达系统中表达。方法]用Trizol试剂提取人肺腺癌A549细胞总RNA,逆转录为cDNA;应用PCR扩增人EERα-LBD基因片段,插入表达载体pET-30a-c(+)中;转化大肠杆菌BL2 l(DE3)PLysS,经IPTG诱导后表达并鉴定。结果]应用PCR方法扩增出约687 bp的基因片段,酶切、纯化、连接至载体后,经测序与GenBank中的一致,表达蛋白相对分子质量约32 kD,纯化后用生物大分子相互作用系统鉴定为目的蛋白。结论]已成功获得人EERα-LBD融合蛋白,为进一步的研究和应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 雌激素相关受体α配体 基因克隆 原核表达 |
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