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新疆耐盐植物藜的甜菜碱醛脱氢酶基因(CaBADH)的克隆、盐胁迫表达分析及植物表达载体的构建
引用本文:袁军文,谷丽丽,陈莎莎,徐栋生,兰海燕.新疆耐盐植物藜的甜菜碱醛脱氢酶基因(CaBADH)的克隆、盐胁迫表达分析及植物表达载体的构建[J].新疆农业科学,2010,47(7):1273.
作者姓名:袁军文  谷丽丽  陈莎莎  徐栋生  兰海燕
作者单位:新疆大学生命科学与技术学院,新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐,830046
基金项目:国家自然科学基金,新疆维吾尔自治区科技攻关重大专项,新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金 
摘    要:目的]为开展植物耐盐基因工程提供候选基因.方法]研究以新疆耐盐植物藜为材料,利用同源克隆技术从藜中克隆到BADH基因,并通过RT-PCR方法对其在不同盐胁迫下的表达进行了初步分析,随后将该基因构建至高效植物表达载体pCN2300上.结果](1)经测序分析并与藜科其他植物进行同源性比对显示,得到的序列为藜的BADH基因,开放阅读框长度为1 503 bp,编码500个氨基酸;(2)以BADH基因核心序列设计引物对此基因在盐胁迫下的表达进行了RT-RCR分析,发现其本底表达量较高,以100 mmol/L NaCl处理2、5、12和24 h后其表达量没有明显增加趋势,而以50 mmol/L- NaCl或KCl长期胁迫后其表达量则比对照和100 mmol/L时的表达量高;(3)经双酶切鉴定,已成功将CaBADH基因构建到植物表达载体pCN2300,得到重组质粒pCN2300-CaBADH.结论]研究为进一步从生理和分子水平阐明藜的耐盐机制提供了一定参考.并为通过转基因技术获得耐盐作物新品种打下基础.

关 键 词:  甜菜碱醛脱氢酶基因  盐胁迫  表达分析  表达载体构建
收稿时间:2010-07-25

Cloning of Betaine Aldehyde Dehydrogenase Gene(CaBADH)from Chenopodium album L. and Expression Analysis of Salt Stress and Construction of Plant Expression Vector
YUAN Jun-wen,GU Li-li,CHEN Sha-sha,XU Dong-sheng,LAN Hai-yan.Cloning of Betaine Aldehyde Dehydrogenase Gene(CaBADH)from Chenopodium album L. and Expression Analysis of Salt Stress and Construction of Plant Expression Vector[J].Xinjiang Agricultural Sciences,2010,47(7):1273.
Authors:YUAN Jun-wen  GU Li-li  CHEN Sha-sha  XU Dong-sheng  LAN Hai-yan
Abstract:
Keywords:Chenopodium album L    betaine aldehyde dehydrogenase gene  salt stress  expression analysis  plant expression vector construction
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