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蓝舌病病毒VP5蛋白的原核表达及其抗原性分析
引用本文:赵大维,朱彦青,陈伟业,胡倩倩,殷倩倩,黄克和,步志高.蓝舌病病毒VP5蛋白的原核表达及其抗原性分析[J].中国预防兽医学报,2012,34(8):607-610.
作者姓名:赵大维  朱彦青  陈伟业  胡倩倩  殷倩倩  黄克和  步志高
作者单位:1. 南京农业大学动物医学学院,江苏南京210095;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001
2. 南京农业大学公共管理学院,江苏南京,210095
3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江哈尔滨,150001
4. 南京农业大学动物医学学院,江苏南京,210095
基金项目:国家自然科学基金青年基金
摘    要:为表达蓝舌病病毒(BTV)VP5蛋白并检测其生物学活性,本实验采用RT-PCR方法扩增血清12型BTV的VP5基因,构建重组质粒pMAL-VP5。将重组质粒转化TB1感受态细胞,以0.4 mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示,融合了大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)标签的VP5重组蛋白以可溶形式表达,分子质量约为112.2 ku。利用MBP标签对重组蛋白进行纯化,并以其作为包被抗原,间接ELISA检测山羊血清样品,结果 5份羊血清P/N值均大于1,其中有1只羊检测结果 P/N值为2.396,鉴定为阳性血清,表明重组蛋白可以与VP5抗体反应,可以作为检测BTV VP5抗体的抗原,为今后进一步开展BT诊断研究奠定了基础。

关 键 词:蓝舌病病毒  VP5基因  原核表达  间接ELISA

Prokaryotic expression and characterization of bluetongue virus VP5 gene
ZHAO Da-wei , ZHU Yan-qing , CHEN Wei-ye , HU Qian-qian , YIN Qian-qian , HUANG Ke-he , BU Zhi-gao.Prokaryotic expression and characterization of bluetongue virus VP5 gene[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2012,34(8):607-610.
Authors:ZHAO Da-wei  ZHU Yan-qing  CHEN Wei-ye  HU Qian-qian  YIN Qian-qian  HUANG Ke-he  BU Zhi-gao
Institution:1.College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Jiangsu 210095,China;2.State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Insitute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China; 3.College of Public Management,Nanjing Agricultural University,Jiangsu 210095,China)
Abstract:
Keywords:
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