| 新城疫病毒classⅠ和classⅡ微型基因组的构建及其复制效率差异性的比较 |
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| 引用本文： | 于洋,仇旭升,韦娜娜,詹媛,丁娜,于圣青,秦爱建,丁铲.新城疫病毒classⅠ和classⅡ微型基因组的构建及其复制效率差异性的比较[J].中国预防兽医学报,2012,34(5):355-359. |
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| 作者姓名： | 于洋 仇旭升 韦娜娜 詹媛 丁娜 于圣青 秦爱建 丁铲 |
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| 作者单位： | 1. 扬州大学兽医学院,江苏扬州225009;中国农业科学院上海兽医研究所国家家禽工程技术研究中心,上海200241
2. 中国农业科学院上海兽医研究所国家家禽工程技术研究中心,上海,200241
3. 扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)专项，863项目，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 为研究新城疫病毒(NDV)微型基因组的复制效率,本实验分别以NDV 9a5b(ClassⅠ)病毒株和La Sota(ClassⅡ)病毒株基因组骨架为平台,插入绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因替代病毒的整个编码区,只保留与病毒复制、转录和病毒包装相关的调控区域Leader和Trailer,构建获得的微型基因组DNA片段反向插入反向遗传载体TVT(0.0)中,从而构建了两株病毒的微型基因组质粒。同时,将相应病毒株的NP、P和L 3个基因分别克隆至pCI-neo载体中,构建3个辅助质粒的真核表达系统。通过将微型基因组和辅助质粒共转染BSR T7/5T7-5细胞,表明在相同转染条件下,无论使用哪一种辅助质粒,ClassⅡ型微型基因组的报告基因的表达效率均高于ClassⅠ型微型基因组。实验结果显示ClassⅠNDV转录复制系统的运行效率明显低于ClassⅡNDV。
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| 关 键 词： | 新城疫病毒 微型基因组 共转染 |
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