基因芯片技术检测5种马病毒的研究 |
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引用本文: | 朱来华;梁成珠;陆承平;吴华;杨元杰;马丰忠;王树峰;于红光.基因芯片技术检测5种马病毒的研究[J].农业生物技术学报,2006,14(2):203-207. |
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作者姓名: | 朱来华;梁成珠;陆承平;吴华;杨元杰;马丰忠;王树峰;于红光 |
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作者单位: | 南京农业大学动物医学院, 南京 210095 山东检验检疫局, 青岛 266002 |
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摘 要: | 通过分子克隆技术获得马疱疹病毒1型(Equine herpesvirus 1, EHV1)、马动脉炎病毒(Equine arteritis virus , EAV)、马流感病毒(Equine influenza virus, EIV)、马传染性贫血病毒(Equine infectious anaemia virus , EIAV)和东部马脑脊髓炎病毒(Eastern equine encephalomyelitis virus, EEEV)等5种病毒各一段高度保守的特异性基因片段,用芯片点样仪逐点分配到处理过的玻片上,制备成检测芯片。提取样品中的RNA,进行反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交,对杂交结果进行扫描检测和计算机软件分析。结果显示,制备的基因芯片可同时检测和鉴别上述5种病毒,可检测到阳性杂交信号的最高稀释度为10-6的病毒液,约25个病毒DNA拷贝,但其它病毒材料未见红色荧光信号,证明了本方法的特异性。在进口马的隔离检疫期间,采集马鼻肺炎、马动脉炎中和抗体阳性但病毒分离阴性马匹的白细胞悬液,分别在EHV1和EAV位点处可检测到阳性杂交信号。证明基因芯片技术不但快速、准确和敏感,而且可同时进行多种病毒的检测。
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关 键 词: | 基因芯片 杂交 马疱疹病毒1型 马动脉炎病毒 马流感病毒 马传染性贫血病毒 东部马脑脊髓炎病毒 |
收稿时间: | 2005-9-5 |
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