| 豆梨铵转运蛋白基因PcAMT1-1 和PcAMT1-2 的克隆与功能鉴定 |
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| 引用本文： | 丛 郁,杨顺瑛,金 曼,郝东利,苏彦华.豆梨铵转运蛋白基因PcAMT1-1 和PcAMT1-2 的克隆与功能鉴定[J].园艺学报,2013,40(11):2115-2126. |
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| 作者姓名： | 丛 郁 杨顺瑛 金 曼 郝东利 苏彦华 |
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| 作者单位： | 中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室，南京 210008 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目（91125028）；中国博士后基金项目（20090461150） |
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| 摘 要： | 为探明豆梨（Pyrus calleryana Dcne.）铵转运蛋白基因家族成员的序列特征、生理功能和表达特点，以豆梨幼苗为材料，运用电子克隆与3′-RACE 技术获得2 个铵转运蛋白基因PcAMT1-1 和PcAMT1-2，采用酵母互补和半定量RT-PCR 方法研究它们的生理功能与表达特点。结果表明：PcAMT1-1和PcAMT1-2 开放阅读框为1 518 bp 和1 515 bp，编码的蛋白分别含505 和504 个氨基酸残基。PcAMT1-1和PcAMT1-2 分别与甜橙 × 枳后代CpAMT（ABI52423）和茶CsAMT1;2（AB114913）的同源性最高（81.96%和78.31%）。PcAMT1-1 和PcAMT1-2 转入酵母均能使铵转运体缺失突变菌株31019b 恢复NH4+吸收能力，在酸性条件下（pH 4.8 或5.8）PcAMT1-1 和PcAMT1-2 对31019b 的互补效果均优于中性条件（pH 6.8）。NH4+有毒类似物MeA+可以显著抑制转PcAMT1-1 酵母31019b 的生长，该物质对转PcAMT1-2酵母31019b 无抑制效果；谷氨酰胺合成酶抑制剂MSX 可有效抑制PcAMT1-2 对酵母31019b 的互补效果，对PcAMT1-1 的互补效果无显著影响。正常供铵，PcAMT1-1 主要在叶中表达，PcAMT1-2 主要在根中表达；无氮处理后，PcAMT1-1 和PcAMT1-2 在根中的表达先上调后下降；重新供铵后，它们的表达量恢复；地上部的表达对上述处理无显著响应。综上所述，PcAMT1-1 和PcAMT1-2 在豆梨中具有吸收或转运NH4+的功能，并可能具备不同的调控机制。
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| 关 键 词： | 豆梨 铵转运蛋白基因 克隆 表达特点 功能互补 |
Molecular Cloning and Function Analyses of Two Ammonium Transporter Protein Genes from Pyrus calleryana |
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| CONG Yu,YANG Shun-Ying,JIN Man,HAO Dong-Li,SU Yan-Hua.Molecular Cloning and Function Analyses of Two Ammonium Transporter Protein Genes from Pyrus calleryana[J].Acta Horticulturae Sinica,2013,40(11):2115-2126. |
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| Authors: | CONG Yu YANG Shun-Ying JIN Man HAO Dong-Li SU Yan-Hua |
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| Institution: | State Key Laboratory of Soil and Sustainable Agriculture，Institute of Soil Science，Chinese Academy of Sciences，Nanjing
210008，China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pyrus calleryana Pyrus calleryana ammonium transport protein gene cloning expression feature functional complementation |
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