| 抗鹅α-干扰素单链抗体基因扩增与表达 |
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| 引用本文： | 姚志兰,邓祖丽颖,傅宏庆,黄平,江明香,刘永鑫,王永娟.抗鹅α-干扰素单链抗体基因扩增与表达[J].河南农业科学,2016(8):136-139. |
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| 作者姓名： | 姚志兰 邓祖丽颖 傅宏庆 黄平 江明香 刘永鑫 王永娟 |
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| 作者单位： | 1. 江苏农牧科技职业学院江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏泰州,225300;2. 郑州幼儿师范学校,河南郑州,450000;3. 湖州市安吉县畜牧兽医局,浙江安吉,313000;4. 安吉以琳生物科技有限公司,浙江湖州,313000;5. 阜宁县鑫永生态饲养场,江苏阜宁,224400 |
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| 基金项目： | 江苏省“六大人才”高峰第十二批培养对象支助项目(10410015002)，江苏省农业科技支撑计划(BE2014380)，江苏农牧科技学院“凤凰人才工程”项目，江苏农牧科技职业学院重点支持项目(NSFZD1405 |
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| 摘 要： | 为制备抗鹅α-干扰素的单链抗体,以抗鹅α-干扰素的杂交瘤细胞株总RNA为模板,RT-PCR法扩增鹅α-干扰素的抗体轻、重链基因,再采用SOE-PCR法,以编码柔性多肽(Gly4Ser)3为接头,组装出完整的鹅α-干扰素的单链抗体可变区片段(Sc Fv)基因,并将Sc Fv基因克隆到p GEMT-Easy载体中进行测序分析,将测序正确的Sc Fv基因片段克隆入p ET-30a载体中进行诱导表达。结果显示,成功组装了Sc Fv基因,其全长为726 bp,为VH-Linker-VL结构,其中VH长357 bp、VL长324 bp,成功表达了Sc Fv蛋白,大小为27 ku。
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| 关 键 词： | 鹅 α-干扰素 单链抗体 测序 表达 |
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