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基因VI型新城疫病毒反转录数字PCR检测方法的建立与应用
引用本文:王静静,舒波,于晓慧,克军宏,邢安琪,彭真奇,刘华雷.基因VI型新城疫病毒反转录数字PCR检测方法的建立与应用[J].中国动物检疫,2022,39(9):115-120.
作者姓名:王静静  舒波  于晓慧  克军宏  邢安琪  彭真奇  刘华雷
基金项目:国家重点研发计划项目(2016YFD0500800);中国动物卫生与流行病学中心创新基金项目
摘    要:基因VI型新城疫病毒(NDV)是导致我国当前鸽新城疫流行的主要基因型。国家新城疫参考实验室监测数据表明,鸽NDV分离率近年来有上升趋势。为了实现基因VI型NDV快速检测和精确定量,针对国内流行的基因VI型NDV F基因保守区域设计特异性引物和探针,建立了反转录数字PCR(RT-dPCR)方法,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了评估。结果显示,建立的RT-dPCR方法线性关系良好,灵敏度高,最低检测限为1.97 copies/μL;特异性强,与其他基因型NDV强毒株和常见禽病病毒无交叉反应;重复性好,变异系数为2.2%。利用本方法对临床采集的180份鸽口咽/泄殖腔拭子样品进行检测,检测结果与病毒分离结果一致。以上结果表明,本研究建立的RT-dPCR方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可用于基因VI型NDV的快速检测和精准定量,同时也为基因VI型NDV核酸标准物质研制奠定了基础。

关 键 词:新城疫病毒  基因VI型  反转录数字PCR

Establishment and Application of RT-dPCR Assay for Detecting Newcastle Disease Virus Genotype VI
Wang Jingjing,Shu Bo,Yu Xiaohui,Ke Junhong,Xing Anqi,Peng Zhenqi,Liu Hualei.Establishment and Application of RT-dPCR Assay for Detecting Newcastle Disease Virus Genotype VI[J].China Journal Of Animal Quarantine,2022,39(9):115-120.
Authors:Wang Jingjing  Shu Bo  Yu Xiaohui  Ke Junhong  Xing Anqi  Peng Zhenqi  Liu Hualei
Abstract:
Keywords:
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