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番茄SlβCA3在防御丁香假单胞菌番茄致病变种中的功能
引用本文:方瀚墨,胡璋健,马巧梅,丁淑婷,王萍,王安然,师恺.番茄SlβCA3在防御丁香假单胞菌番茄致病变种中的功能[J].中国农业科学,2022,55(14):2740-2751.
作者姓名:方瀚墨  胡璋健  马巧梅  丁淑婷  王萍  王安然  师恺
作者单位:1.浙江大学农业与生物技术学院,杭州 3100582.浙江大学海南研究院,海南三亚 572025
基金项目:浙江省重点研发计划(2021C02040);;浙江省自然科学基金杰青项目(LR19C150001);
摘    要:【背景】在全球气候变化的背景下,大气CO2浓度的升高会影响植物病害的发生,进而影响农业生产。β型碳酸酐酶(β- carbonic anhydrase,βCA)是植物CO2感应和浓缩系统中的重要组成元件,参与拟南芥和烟草的植物免疫过程,但在番茄(Solanum lycopersicum)等园艺作物中的研究较少。【目的】通过探究番茄SlβCA3在抵御植物病害中的作用及机制,为番茄生产中的抗性调控提供科学依据。【方法】以拟南芥AtβCA氨基酸系列为参考序列,在番茄Sol genomics network 数据库中鉴定到4个SlβCA。进一步以野生型(wild-type,WT)番茄‘Ailsa Craig’(AC)为材料接种丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000,Pst DC3000),利用qRT-PCR技术测定叶片中SlβCA的表达量,筛选出受Pst DC3000诱导表达的基因SlβCA3。在此基础上,以AC为背景,利用农杆菌介导法进行番茄遗传转化,构建SlβCA3稳定过表达植株(OE-SlβCA3)。通过观察OE-SlβCA3植株接种Pst DC3000后的抗性表型,明确SlβCA3在番茄抵御Pst DC3000过程中的作用。为了研究SlβCA3调控植物抗病性的内在机制,比较WT和OE-SlβCA3植株接种Pst DC3000与对照条件下转录组的变化,并利用KEGG数据库对差异基因进行功能分析,推测糖代谢与SlβCA3介导的免疫反应有关。最后,通过测定WT和OE-SlβCA3植株糖代谢及其信号途径相关基因表达量以及葡萄糖、果糖和蔗糖含量,对转录组结果进行验证及分析。【结果】OE-SlβCA3植株对Pst DC3000的抗性增强,接种Pst DC3000后,叶片中的细菌生长量、病斑数以及死细胞积累量明显减少。转录组测序结果显示,正常条件下,OE-SlβCA3植株转录谱没有发生明显变化;接种Pst DC3000后,在WT和OE-SlβCA3植株中检测到2 100个Pst DC3000诱导基因,其中有63.3%的基因在OE-SlβCA3植株中表达量更高。KEGG分析结果显示,依赖于SlβCA3过表达的Pst DC3000诱导基因富集在糖代谢相关路径中,包括淀粉和蔗糖代谢,内质网中的蛋白质加工(糖基化),氨基糖和核苷酸糖代谢,真核生物中的核糖体生物合成以及光合作用等路径。糖代谢与糖信号密不可分,qRT-PCR及糖含量测定结果显示,接种Pst DC3000后,OE-SlβCA3植株叶片中糖代谢及其信号传导途径相关基因表达量与葡萄糖、果糖和蔗糖的含量较WT更高。【结论】番茄SlβCA3的过表达增强了植株对Pst DC3000的抗性,该过程可能与糖代谢及其信号通路在植物免疫中的作用有关。

关 键 词:番茄  SlβCA  丁香假单胞菌番茄致病变种  抗病性  糖代谢  糖信号  
收稿时间:2021-12-23

Function of SlβCA3 in Plant Defense Against Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000
FANG HanMo,HU ZhangJian,MA QiaoMei,DING ShuTing,WANG Ping,WANG AnRan,SHI Kai.Function of SlβCA3 in Plant Defense Against Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000[J].Scientia Agricultura Sinica,2022,55(14):2740-2751.
Authors:FANG HanMo  HU ZhangJian  MA QiaoMei  DING ShuTing  WANG Ping  WANG AnRan  SHI Kai
Institution:1. College of Agriculture and Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 3100582. Hainan Institute of Zhejiang University, Sanya 572025, Hainan
Abstract:
Keywords:tomato (Solanum lycopersicum)  SlβCA   Pst DC3000  disease resistance  sugar metabolism  sugar signaling  
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