| 副猪嗜血杆菌四环素耐药基因TetB的PCR检测方法建立 |
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| 引用本文： | 江军,李军星,康磊,袁秀芳,徐丽华,王一成.副猪嗜血杆菌四环素耐药基因TetB的PCR检测方法建立[J].浙江农业科学,2014,1(12):1924-1927. |
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| 作者姓名： | 江军 李军星 康磊 袁秀芳 徐丽华 王一成 |
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| 作者单位： | 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所;南京农业大学动物医学院;安徽农业大学动物科技学院; |
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| 基金项目： | 畜禽健康养殖科技创新团队项目(2010R50027) |
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| 摘 要： | 在本实验室前期研究的基础上，选取与四环素耐药表型相关性较好的TetB基因，建立PCR方法，以探索副猪嗜血杆菌耐药性的快速检测方法。本研究利用四环素主要耐药基因TetB的引物，对PCR反应条件进行优化，以副猪嗜血杆菌基因组DNA为模板，未出现非特异性扩增条带，PCR扩增条带单一。将TetB基因克隆至pMD 19T载体，以重组质粒为标准品，确定了最低检测拷贝数，经测定，最低检测拷贝数为154×103。以不同稀释度的21A7菌株基因组DNA为模板，确定了最低细菌检出量，经测定，最低检测细菌数量为46×103个。该方法为建立临床快速检测副猪嗜血杆菌耐药性奠定了基础。
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| 关 键 词： | 副猪嗜血杆菌 耐药基因TetB PCR检测 |
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