| 大豆二酰甘油酰基转移酶基因GmDGAT1A启动子的克隆与功能分析 |
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| 引用本文： | 晁毛妮,胡喜贵,张晋玉,王润豪,温青玉,孙新凯,黄中文.大豆二酰甘油酰基转移酶基因GmDGAT1A启动子的克隆与功能分析[J].华北农学报,2020,35(4):27-34. |
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| 作者姓名： | 晁毛妮 胡喜贵 张晋玉 王润豪 温青玉 孙新凯 黄中文 |
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| 作者单位： | 河南科技学院,现代生物育种河南省协同创新中心,河南 新乡 453003,河南科技学院,现代生物育种河南省协同创新中心,河南 新乡 453003,河南科技学院,现代生物育种河南省协同创新中心,河南 新乡 453003,河南科技学院,现代生物育种河南省协同创新中心,河南 新乡 453003,河南省农业科学院,河南 郑州 450002,河南科技学院,现代生物育种河南省协同创新中心,河南 新乡 453003,河南科技学院,现代生物育种河南省协同创新中心,河南 新乡 453003 |
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| 基金项目： | 河南省研究生教育改革与质量提升工程项目;国家自然科学基金;河南省科技攻关计划;河南省博士后基金 |
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| 摘 要： | 二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是催化三酰甘油生物合成的关键酶,在三酰甘油的合成和积累过程中具有重要调控作用。为了研究大豆DGAT基因表达调控的分子机制,以大豆品种科丰1号为材料,通过PCR方法对GmDGAT1A的启动子(promoter-GmDGAT1A,pGmDGATIA)进行克隆,并通过转化拟南芥和GUS组织定位研究其功能。结果表明:以大豆叶片DNA为模板,成功克隆到GmDGAT1A基因ATG上游2 192 bp启动子序列。序列分析表明,pGmDGAT1A除具有启动子所必需的TATA-box和CAAT-box等基本顺式作用元件外,还含有多个响应于光、赤霉素和脱落酸等顺式作用元件。以GUS为报告基因,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1381Z-pGmDGAT1A,并转化野生型拟南芥获得转基因植株。对转基因拟南芥植株进行PCR检测,能扩增到2 192 bp目标条带,表明已获得含有pGmDGAT1A的转基因拟南芥阳性植株。GUS组织化学染色结果显示,转基因拟南芥幼苗的叶脉和根染色较深,但是主根和侧根的根尖部分未染色;成熟期转基因拟南芥植株的根、叶脉以及角果内的隔膜和珠柄染色较深,茎和发育的种子未染色,表明pGmDGAT1A驱动的GUS主要在转基因拟南芥的根、叶脉以及角果内的隔膜和珠柄中表达。综上,克隆的大豆GmDGAT1A启动子具有活性,能够驱动下游目标基因的表达,有望应用于转基因育种。
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| 关 键 词： | 大豆 二酰甘油酰基转移酶(DGAT) 启动子 油脂 GUS |
Cloning and Functional Analysis of Promoter of Diacylglycerol
Acyltransferase Gene GmDGAT1A in Soybean |
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| CHAO Maoni,HU Xigui,ZHANG Jinyu,WANG Runhao,WEN Qingyu,SUN Xinkai,HUANG Zhongwen.Cloning and Functional Analysis of Promoter of Diacylglycerol
Acyltransferase Gene GmDGAT1A in Soybean[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2020,35(4):27-34. |
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| Authors: | CHAO Maoni HU Xigui ZHANG Jinyu WANG Runhao WEN Qingyu SUN Xinkai HUANG Zhongwen |
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