| 卵黄抗体五种提取工艺比较及初步应用 |
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| 引用本文： | 向冬梅,易思宇,唐青海,吴思雯,王姝姝,李彦,黎露,韩涛涛.卵黄抗体五种提取工艺比较及初步应用[J].湖北农业科学,2020,59(15):108-113. |
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| 作者姓名： | 向冬梅 易思宇 唐青海 吴思雯 王姝姝 李彦 黎露 韩涛涛 |
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| 作者单位： | 衡阳师范学院生命科学与环境学院/衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所,湖南 衡阳 421008;青岛农业大学生命科学学院,山东 青岛 266109,衡阳师范学院生命科学与环境学院/衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所,湖南 衡阳 421008;广西大学动物科学技术学院,南宁 530004,衡阳师范学院生命科学与环境学院/衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所,湖南 衡阳 421008,衡阳师范学院生命科学与环境学院/衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所,湖南 衡阳 421008,衡阳师范学院生命科学与环境学院/衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所,湖南 衡阳 421008,衡阳师范学院生命科学与环境学院/衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所,湖南 衡阳 421008,衡阳师范学院生命科学与环境学院/衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所,湖南 衡阳 421008,衡阳师范学院生命科学与环境学院/衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所,湖南 衡阳 421008 |
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| 基金项目： | 湖南省教育厅优秀青年项目;仔猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和致病性大肠杆菌三价抗体的研究;衡阳师范学院青年英才支持计划;校企合作项目 |
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| 摘 要： | 为了得到较优的卵黄抗体提取工艺,试验改良了辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法与聚乙二醇沉淀法5种提取方法。IPGT诱导表达重组猪致病性大肠杆菌(Escherichia coli)毒素STxB蛋白(rSTxB),与佐剂71VG乳化制备免疫原免疫蛋鸡,利用改良的聚乙二醇沉淀法提取高免卵黄抗体,采用SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,通过Western blot检测卵黄抗体和血清抗体效价。结果表明,辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法、聚乙二醇沉淀法提取效率分别为96.00、81.99、155.50、65.34、46.00 mg/mL,其中聚乙二醇沉淀法的提取纯度最高。重组STxB蛋白分子量大小约25 kDa,血清中抗体效价最高达到64 000倍,卵黄抗体最高稀释倍数为16 000倍。综合评估,聚乙二醇的提取法相对较优,且提取的卵黄抗体具有良好的免疫活性。
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| 关 键 词： | 卵黄抗体 提取工艺 聚乙二醇沉淀法 STxB蛋白 佐剂 |
Comparison and preliminary application of five extraction methods of egg yolk antibody |
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| XIANG Dong-mei,YI Si-yu,TANG Qing-hai,WU Si-wen,WANG Shu-shu,LI Yan,LI Lu,HAN Tao-tao.Comparison and preliminary application of five extraction methods of egg yolk antibody[J].Hubei Agricultural Sciences,2020,59(15):108-113. |
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| Authors: | XIANG Dong-mei YI Si-yu TANG Qing-hai WU Si-wen WANG Shu-shu LI Yan LI Lu HAN Tao-tao |
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