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H5N1亚型高致病性禽流感病毒A/duck/FuJian/01/02株反向基因操作系统的建立
引用本文:索永兵,樊树芳,邓国华,温峰琴,希尼尼根,陈化兰.H5N1亚型高致病性禽流感病毒A/duck/FuJian/01/02株反向基因操作系统的建立[J].农业生物技术学报,2009,17(3).
作者姓名:索永兵  樊树芳  邓国华  温峰琴  希尼尼根  陈化兰
作者单位:索永兵,SUO Yong-bing(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特010018);樊树芳,邓国华,温峰琴,陈化兰,FAN Shu-fang,DENG Guo-hua,WEN Feng-qin,CHEN Hua-lan(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001);希尼尼根,XI NI NI Gen(内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018)  
摘    要:从含A/duck/FuJian/01/02(W-DKFJ)株病毒的鸡胚尿囊液中提取总RNA,用RT-PCR扩增PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS全基因片段,将其分别克隆至PBD载体中.利用8质粒反向遗传操作系统,将重组的PBD质粒共转染293T细胞,成功拯救了该病毒.并命名为R-DKFJ.10(6)EID(50)的W-DKFJ和R-DKFJ分别经鼻腔接种BALB/c小鼠后,观察到两组小鼠体重均明显下降,并且在10d之内全部死亡.与此同时,在感染小鼠后第3天在脑、脾、肾、肺脏等脏器巾分离到病毒,两组小鼠肺脏病毒含量分别为7.4±0.4和7.1±0.1.其MLD(50)分别为O.5log(10)EID(50)/ML和0.98lOg(10)EID/mL.结果表明,救获病毒R-DKFJ与其亲本野生毒W-DKFJ在对哺乳动物模型BALB/c小鼠致病性方面保持着一致的生物学特性.

关 键 词:禽流感病毒  反向遗传  生物学特性

Establishment of Reverse Genetic System of Highly Pathogenic H5Nl Avian influenza virus AL/duek/Fuiian/01/02
SUO Yong-bing,FAN Shu-fang,DENG Guo-hua,WEN Feng-qin,XI NI NI Gen,CHEN Hua-lan.Establishment of Reverse Genetic System of Highly Pathogenic H5Nl Avian influenza virus AL/duek/Fuiian/01/02[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2009,17(3).
Authors:SUO Yong-bing  FAN Shu-fang  DENG Guo-hua  WEN Feng-qin  XI NI NI Gen  CHEN Hua-lan
Abstract:
Keywords:H5Nl
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