| 基因组步移技术扩增嗜水气单胞菌J-1株脂酶基因全长及原核表达 |
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| 引用本文： | 巢伟,刘永杰,陆承平.基因组步移技术扩增嗜水气单胞菌J-1株脂酶基因全长及原核表达[J].动物医学进展,2010,31(9). |
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| 作者姓名： | 巢伟 刘永杰 陆承平 |
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| 作者单位： | 南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏南京,210095 |
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| 摘 要： | 根据已发表的引物序列合成一对引物,以嗜水气单胞菌J-1株基因组为模板扩增脂酶基因,得到一个保守的383 bp基因片段。进一步应用基因组步移技术扩增其两侧未知序列,分别以DraⅠ,EcoRⅤ,PvuⅡ,ScaⅠ,StuⅠ,SmaⅠ6个内切酶酶切的基因组构建6个不同的基因组步移文库,再以基因组步移文库为模板,设计引物向已获得的保守片段两侧进行PCR扩增,将扩增到的两侧序列与保守片段拼接后得到一个3 476 bp的片段,通过DNA Star软件分析,找到一个2 415 bp的开放阅读框,经Blast软件分析,其与嗜水气单胞菌ATCC 7966脂酶、嗜水气单胞菌AH-3磷脂酶A1、嗜水气单胞菌H3脂酶、嗜水气单胞菌Mcc-2脂酶、嗜水气单胞菌J MP636磷脂酶C的序列同源性分别为97%、97%、88%、83%和82%。将DNA序列翻译成氨基酸序列后,发现其包含一个多肽序列(VHFLGHSLGA),这个序列在脂酶中高度保守。
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| 关 键 词： | 嗜水气单胞菌 基因组步移 脂酶 |
Amplification of Complete Lipase Gene of Aeromonas hydrophila J-1 by Genome Walking Technique and Prokaryotic Expression |
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| CHAO Wei,LIU Yong-jie,LU Cheng-ping.Amplification of Complete Lipase Gene of Aeromonas hydrophila J-1 by Genome Walking Technique and Prokaryotic Expression[J].Progress In Veterinary Medicine,2010,31(9). |
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| Authors: | CHAO Wei LIU Yong-jie LU Cheng-ping |
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| Institution: | CHAO Wei,LIU Yong-jie,LU Cheng-ping(Key Laboratory of Animal Disease Diagnosis and Immunology of Ministry of Agriculture,Nanjing Agriculture University,Nanjing,Jiangsu,210095,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aeromonas hydrophila genome walking lipase |
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