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狗牙根SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选
引用本文:王志勇,袁学军,刘建秀,郭海林.狗牙根SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选[J].草业学报,2008,17(3):79-85.
作者姓名:王志勇  袁学军  刘建秀  郭海林
作者单位:南京农业大学园艺学院,江苏,南京210095;江苏省中国科学院植物研究所,江苏,南京,210014;江苏省中国科学院植物研究所,江苏,南京,210014
摘    要:利用正交设计,从Mg2 、dNTP、引物浓度和DNA聚合酶4种因素3个水平以及不同的模板DNA浓度来优化狗牙根SRAP-PCR反应体系,并对引物进行了全面筛选。狗牙根SRAP-PCR优化反应体系结果为:2μL 10×buffer4、0 ng模板DNA、Mg2 1.25 mmol/Ld、NTP 260μmol/L、引物0.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.0 U,总体积20μL。运用该结果从90对引物中共筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物34对。优化体系的建立及其引物的筛选为今后利用SRAP标记技术进行狗牙根遗传分析、图谱构建、基因定位与种质资源鉴定奠定了技术基础。

关 键 词:狗牙根  SRAP标记  正交试验  体系优化  引物
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