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马铃薯纺锤块茎类病毒山西分离物侵染性克隆的构建
引用本文:白云凤,闫建俊,张耀,张忠梁,冯瑞云,张维锋.马铃薯纺锤块茎类病毒山西分离物侵染性克隆的构建[J].山西农业科学,2012,40(7):701-704.
作者姓名:白云凤  闫建俊  张耀  张忠梁  冯瑞云  张维锋
作者单位:山西省农业科学院作物科学研究所,农业部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室,山西太原030032
基金项目:国家自然科学基金,山西省国际科技合作项目,山西省回国留学人员科研资助项目
摘    要:马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viriod,PSTVd)侵染马铃薯会严重影响薯块的产量和品质。根据PSTVd的同源序列设计引物,以山西省马铃薯感病块茎中提取的总RNA为模板,经RT-PCR方法扩增出全长cDNA片段,将其克隆到质粒pBS-T载体上,进行序列分析。结果表明,该类病毒全长359 nt,能通过分子内序列互补形成致密的二级结构。以该序列作为种子序列进行Blast搜索,该序列与PSTVd荷兰分离物(GenBank登陆号:AY372400.1)的序列一致性为100%。将该序列与东北株系、河北株系及已公布的弱株系(GenBank登陆号:M14814.1)、强株系(GenBank登陆号:U23058.1)、中间株系(GenBank登陆号:AY937179.1)比对,有12个核苷酸具有多态性,其中有5个发生在致病区。将线性化的质粒pBS-PSTVd及其PSTVd的体外转录产物接种番茄矮红宝的无毒苗,20 d后接种株轻微显症,RT-PCR检测均呈阳性。将RT-PCR产物测序,其结果与接种的PSTVd原序列完全一致,证实构建的PSTVd山西分离物的克隆具有侵染性。

关 键 词:马铃薯纺锤块茎类病毒  山西分离物  序列分析  体外转录  侵染性克隆

Construction of Infectious Clone for Potato Spindle Tuber Viriod Shanxi Isolate
BAI Yun-feng , YAN Jian-jun , ZHANG Yao , ZHANG Zhong-liang , FENG Rui-yun , ZHANG Wei-feng.Construction of Infectious Clone for Potato Spindle Tuber Viriod Shanxi Isolate[J].Journal of Shanxi Agricultural Sciences,2012,40(7):701-704.
Authors:BAI Yun-feng  YAN Jian-jun  ZHANG Yao  ZHANG Zhong-liang  FENG Rui-yun  ZHANG Wei-feng
Institution:(Key Labotary of Loess Plateau Crop Gene Resources & Germplasm Creation of Agriculture Ministry,Institute of Crop Sciences,Shanxi Academy of Agricultural Sciences,Taiyuan 030032,China)
Abstract:
Keywords:
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