| 鸡cGAS基因的克隆、表达特性分析及FAdV-4感染前后亚细胞定位变化 |
| |
| 引用本文： | 曹影丽,刘琪,柴震震,杨侃侃,梁月巧,宋祥军,邵颖,涂健,祁克宗.鸡cGAS基因的克隆、表达特性分析及FAdV-4感染前后亚细胞定位变化[J].江苏农业学报,2023(2):453-460. |
| |
| 作者姓名： | 曹影丽 刘琪 柴震震 杨侃侃 梁月巧 宋祥军 邵颖 涂健 祁克宗 |
| |
| 作者单位： | 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室/安徽省动物性食品质量与生物安全工程实验室 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31972642)； |
| |
| 摘 要： | cGAS作为一种新型的胞质DNA受体，在宿主抵抗DNA病毒而触发的天然免疫中起着至关重要的作用。血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)是无囊膜的一种双链DNA病毒，可引起鸡肝炎-心包积液综合征。为明确鸡cGAS(chcGAS)基因功能，探究在鸡肝癌(LMH)细胞中过表达chcGAS以及FAdV-4感染前后细胞定位的变化情况。本研究针对chcGAS序列设计引物进行PCR扩增，并分析该基因序列与其他物种之间的同源性以及预测该基因的结构域，构建重组质粒pET-32a-chcGAS进行原核表达，通过SDS-PAGE和Western blot鉴定，利用激光共聚焦观察FAdV-4感染LMH细胞前后chcGAS细胞定位变化。结果表明，本试验克隆得到大小为1 317 bp的chcGAS基因，与其他物种同源性为50.5%～84.4%,SDS-PAGE分析结果显示，chcGAS蛋白主要以可溶性蛋白质的形式在上清液处表达，目的蛋白质相对分子质量为75 000,与预期大小相符。亚细胞定位结果显示，FAdV-4感染可导致定位于细胞核膜上的chcGAS蛋白转移到细胞...
|
| 关 键 词： | cGAS 血清4型禽腺病毒(FAdV-4) 序列分析 原核表达 亚细胞定位 |
|
|
