| 绞股蓝抗TMV蛋白的分离及编码基因的序列分析* |
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| 引用本文： | 林毅,陈国强,吴祖建,林奇英,谢联辉.绞股蓝抗TMV蛋白的分离及编码基因的序列分析*[J].农业生物技术学报,2003,11(4):365-369. |
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| 作者姓名： | 林毅 陈国强 吴祖建 林奇英 谢联辉 |
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| 作者单位： | 福建农林大学植物病毒研究所,福建省植物病毒学重点实验室,福州,350002 |
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| 基金项目： | 福建省科技厅重点项目(No.98-Z-178,99-Z-193). |
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| 摘 要： | 以半叶法测定抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus，TMV)活性为监控手段，采用(NH4）2SO4分级沉淀、阳离子交换及亲和层析等方法，从绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)中分离到一种抗TMV蛋白，其分子量约为27kD，N端19个氨基酸残基为DINFSLAGADGQTYNTFIA(SWISS—PROT登录号为P83206)。N端序列分析表明，它是一种新的核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating proteins，RIPs)，命名为gynostemmin。gynostemmin与其它植物RIPs的N端同源性介于10％-73％之间，其中Y14F17构成植物RIPsN端的“钉子”位点；gynostemmin与葫芦科植物RIPs的同源性为31％～73％，其中F4L6A9Y14F17I18,6个残基为葫芦科植物RIPsN端“钉子”位点。根据N端序列和葫芦科植物RIPs下游保守氨基酸序列设计简并引物，采用PCR扩增并克隆了编码gynostemmin的基因，包含609个碱基，推导出的203个氨基酸残基约占成熟蛋白的75％，软件分析表明，它含有核糖体失活蛋白的活性位点区。
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| 关 键 词： | 绞股蓝 抗TMV蛋白 分离 编码基因 序列分析 抗烟草花叶病毒 |
| 修稿时间： | 2002年9月16日 |
Purification of a Novel Anti-TMV Protein from Gynostemma pentaphyllum and Sequence Analysis of Its Partial DNA Coding Region |
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