| 苹果属小金海棠MxIrt1基因特异性片段的原核表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 孙春玉,王忆,孔瑾,许雪锋,李天忠,韩振海.苹果属小金海棠MxIrt1基因特异性片段的原核表达及多克隆抗体的制备[J].园艺学报,2009,36(10):1411-1416. |
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| 作者姓名： | 孙春玉 王忆 孔瑾 许雪锋 李天忠 韩振海 |
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| 作者单位： | (中国农业大学园艺植物研究所, 北京100193; 吉林农业大学生命科学学院, 长春130118) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，北京市果树逆境生理与分子生物学重点实验室项目 |
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| 摘 要： | MxIrt1是从苹果属植物小金海棠中克隆出的二价阳离子转运膜蛋白基因。为进一步研究该基
因的功能, 利用MxIrt1基因位于第3和第4跨膜区之间的162 bp片段, 构建了原核表达载体pGEX-MxIrt1,经原核表达、亲和层析、获得GST2MxIRT1融合蛋白, 以融合蛋白为抗原, 制备多克隆抗体, ELISA方法检测抗体效价阳性, 蛋白质印迹检测植物体内总蛋白, 获得与预期大小一致的特异性条带。上述结果表明,表达的目的蛋白可用于免疫组织化学、蛋白质印迹检测。
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| 关 键 词： | 苹果属 小金海棠 MxIrt1基因 特异片段 原核表达 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2009-3-2 |
| 修稿时间： | 2009-8-29 |
Prokaryotic Expression of MxIrt1 Genes Segment and the Preparation of Its Polyclonal Antibody |
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| SUN Chun-yu,WANG Yi,KONG Jin,XU Xue-feng,LI Tian-zhong,HAN Zhen-hai.Prokaryotic Expression of MxIrt1 Genes Segment and the Preparation of Its Polyclonal Antibody[J].Acta Horticulturae Sinica,2009,36(10):1411-1416. |
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| Authors: | SUN Chun-yu WANG Yi KONG Jin XU Xue-feng LI Tian-zhong HAN Zhen-hai |
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| Institution: | (Institute of Horticultural Plants, China AgriculturalUniversity, Beijing 100193, China; College of Life Sciences, Jilin Agricultural University,Changchun130118, China) |
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| Abstract: | MxIrt1 is a iron transport p rotein gene from M alus xiaojinensis. To study the functional characteristic of MxIrt1, the recombinant plasmid pGEX-MxIrt1 was constructed with 162 bp segments between 3 rd and 4 th TMR (Transmembrane region) , following the expression in E.coli with high efficiency, purification using Glutathione Sepharose 4B, the recombinant GST-MxIRT1 protein was obtained. ELISA assay detected the reactivity of the polycolonal antibody andWestern blot shows that specific band was corresponding to the expectation. The recombinant GST-MxIRT1 protein can also be used for immunohistochemistry. |
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| Keywords: | Malus Malus Malus xiaojinensis Malus xiaojinensis MxIrt1 MxIrt1 specific segment prokaryotic expression polyclonal antibody |
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