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桑椹菌核病菌实时荧光定量PCR检测体系的建立和应用
引用本文:朱志贤,董朝霞,莫荣利,胡兴明,于翠.桑椹菌核病菌实时荧光定量PCR检测体系的建立和应用[J].植物保护学报,2022,49(3):909-916.
作者姓名:朱志贤  董朝霞  莫荣利  胡兴明  于翠
作者单位:湖北省农业科学院经济作物研究所, 武汉 430064
基金项目:国家自然科学基金(31800544);湖北省技术创新专项重大项目(2019ABA090)
摘    要:为及时高效地鉴别桑椹菌核病的病原菌桑实杯盘菌Ciboria shiraiana和肉阜状杯盘菌C. carunculoides,根据RPB2基因序列设计引物并验证其特异性,建立这2种病原菌的实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,q PCR)检测体系,运用该体系对抗、感果桑品种不同时间点芽(果)内的2种病原菌进行检测。结果表明,设计的2对引物特异性强,qPCR检测灵敏度均为10-4ng/μL,均为常规PCR灵敏度的10~5倍,建立的桑实杯盘菌和肉阜状杯盘菌qPCR标准曲线的扩增效率分别为104.89%和95.30%。利用所建方法成功从采集的果桑样品中检测出病原菌主要为肉阜状杯盘菌,且感病品种中肉阜状杯盘菌的含量随着时间不断增加,在将要显症时激增。表明所建qPCR体系适用于桑椹菌核病早期无症状芽(果)的检测,可通过监测其病原菌类型和含量为该病害的预测预报及早期防治提供依据。

关 键 词:桑椹菌核病  桑实杯盘菌  肉阜状杯盘菌  RNA聚合酶Ⅱ第二大亚基  实时荧光定量PCR
收稿时间:2020/9/23 0:00:00

Establishment and application of real-time PCR for detecting pathogens causing mulberry fruit sclerotiniosis
Zhu Zhixian,Dong Zhaoxi,Mo Rongli,Hu Xingming,Yu Cui.Establishment and application of real-time PCR for detecting pathogens causing mulberry fruit sclerotiniosis[J].Acta Phytophylacica Sinica,2022,49(3):909-916.
Authors:Zhu Zhixian  Dong Zhaoxi  Mo Rongli  Hu Xingming  Yu Cui
Institution:Institute of Economic Crops, Hubei Academy of Agricultural Sciences, Wuhan 430064, Hubei Province, China
Abstract:
Keywords:mulberry fruit sclerotiniosis  Ciboria shiraiana  Ciboria carunculoides  the second largest subunit of RNA polymerase  real-time fluorescent quantitative PCR
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