| 甜瓜种子中黄瓜花叶病毒和小西葫芦黄花叶病毒的RT-LAMP可视化检测方法 |
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| 引用本文： | 袁英哲,罗明,韩剑,潘亚南.甜瓜种子中黄瓜花叶病毒和小西葫芦黄花叶病毒的RT-LAMP可视化检测方法[J].中国农学通报,2020,36(20):107-113. |
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| 作者姓名： | 袁英哲 罗明 韩剑 潘亚南 |
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| 作者单位： | 1.新疆农业大学农学院,乌鲁木齐 830052;2.新疆自治区高校农林有害生物监测与安全防控重点实验室,乌鲁木齐 830052 |
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| 基金项目： | 农业部西北荒漠绿洲作物有害生物综合治理重点实验室开放基金课题“‘一年双收’新种植模式下新疆甜瓜病毒病毒原鉴定、分子变异及主要传播源研究”(KFJJ20150103);国家级大学生创新项目“新疆甜瓜病毒病主要病原病毒环介导等温扩增快速检测技术研究”(201610758059) |
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| 摘 要： | 本研究旨在针对甜瓜种子中携带的黄瓜花叶病毒(CMV)和小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV),建立可视化环介导等温扩增检测方法。根据CMV和ZYMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列,分别设计并筛选出2套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,通过对反应体系中主要影响因素的优化,建立适用于快速检测CMV和ZYMV的RT-LAMP检测方法。对优化后的2种LAMP检测方法进行特异性和灵敏度验证。结果表明,建立的2种LAMP检测方法分别能够特异性地检测出CMV和ZYMV,检测灵敏度较常规RT-PCR分别高出10倍和100倍,并且可通过肉眼观察直接对反应结果进行判定。该方法的建立为基层及现场快速检测甜瓜种子的带毒情况提供了新方法。
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| 关 键 词： | 甜瓜种子 黄瓜花叶病毒 小西葫芦黄花叶病毒 反转录环介导等温扩增 可视化检测 |
| 收稿时间： | 2019-08-04 |
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