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| 对PRRSV快速分型的多重RT-PCR方法的建立与应用 | |
| 引用本文： | 林华,郭万柱,韩国全,岳玉红,郭杨,徐志文,颜其贵,王印,李宇.对PRRSV快速分型的多重RT-PCR方法的建立与应用[J].中国兽医学报,2011,31(1). |
| 作者姓名： | 林华 郭万柱 韩国全 岳玉红 郭杨 徐志文 颜其贵 王印 李宇 |
| 作者单位： | 1. 四川农业大学动物生物技术中心,四川,雅安,625014 2. 四川特驱投资有限公司,四川,双流,610207 3. 四川出入境检验检疫局,四川成都,610041 |
| 基金项目： | 教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IR-TO555) |
| 摘 要： | 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)欧洲株、美洲经典株与高致病性Nsp2变异株的Nsp2基因间的差异,设计3对特异性扩增引物,建立快速检测PRRSV欧洲株、美洲经典株和高致病性Nsp2变异株的多重RT-PCR方法。利用PRRSV欧洲株、经典株和高致病性Nsp2变异株及其他相关病毒株进行敏感度和特异性试验。结果显示,所建立的多重RT-PCR对欧洲株、美洲经典株与高致病性Nsp2变异株的RNA最小检出量分别为0.050 2、0.055 4、0.056 4ng,与CSFV、TGEV、JEV、SIV的核酸均无交叉反应。用该方法检测病料76份,结果PRRSV欧洲株、美洲经典株和高致病性Nsp2变异株的阳性率分别为0、7.89%和53.9%,未发现3型病毒间有混合感染的情况。检测结果与单一RT-PCR及RT-PCR检测试剂盒检测结果一致,高于病毒分离。 |
| 关 键 词： | PRRSV欧洲株 PRRSV美洲经典株 PRRSV高致病性Nsp2变异株 多重RT-PCR |
Development and application of multiplex RT-PCR assay techniques for different subtype of porcine reproductive and respiratory syndrome virus |
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| LIN Hua,GUO Wan-zhu,HAN Guo-quan,YUE Yu-hong,GUO Yang,XU Zhi-wen,YAN Qi-gui,WANG Yin,LI Yu.Development and application of multiplex RT-PCR assay techniques for different subtype of porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(1). | |
| Authors: | LIN Hua GUO Wan-zhu HAN Guo-quan YUE Yu-hong GUO Yang XU Zhi-wen YAN Qi-gui WANG Yin LI Yu |
| Institution: | LIN Hua1,GUO Wan-zhu1,HAN Guo-quan1,YUE Yu-hong2,GUO Yang3,XU Zhi-wen1,YAN Qi-gui1,WANG Yin1,LI Yu1(1.Animal Biotechnology Center,Sichuan Agricultural University,Ya'an,Sichuan 625014,China,2.Sichuan Tequ Investment Co.Ltd,Shuangliu,Sichuan 610207,3.Sichuan Export and Import Inspection Quarantine Bureau,Chengdu 610041,China) |
| Abstract: | Established and optimized for rapid and simultaneous detection of European strain,classical and highly pathogenic subtype of porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV).Based on the variation sequences of NSP2 genes of European strain,classical and highly pathogenic subtype of PRRSV,3 sets of specific primers were designed and the multiplex RT-PCR assay was established.Through optimization by using those primers simultaneously,the detection limit of RNA template in the RT-PCR was 0.050 2 ng f... |
| Keywords: | European PRRSV American classical PRRSV highly pathogenic PRRSV multiplex RT-PCR assay |
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