| O型FMDV VP1基因与山羊IL-18基因在昆虫细胞中的共表达与活性检测 |
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| 引用本文： | 王婷婷,范忠玲,王希辉,陈金龙,曹丙蕾,孔娜,胡敬东,赵宏坤.O型FMDV VP1基因与山羊IL-18基因在昆虫细胞中的共表达与活性检测[J].中国兽医学报,2011,31(2). |
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| 作者姓名： | 王婷婷 范忠玲 王希辉 陈金龙 曹丙蕾 孔娜 胡敬东 赵宏坤 |
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| 作者单位： | 1. 山东农业大学动物科技学院,山东,泰安,271018
2. 山东农业大学动物科技学院,山东,泰安,271018;青岛农业大学食品科学与工程学院,山东省肉类食品工程技术研究中心,山东,青岛,266109 |
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| 基金项目： | 山东省科技攻关重大专项(SDSP2005041005) |
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| 摘 要： | 以杆状病毒pFastBacTM Dual为载体,将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因和山羊白介素18(gIL-18)基因,分别插入到双表达载体的P10启动子和多角体蛋白启动子PH的下游,构建重组质粒pFastBacTMDual-gIL18-VP1,然后转化DH10Bac感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-gIL18-VP1,并利用昆虫细胞进行转染。间接免疫荧光试验(IFA)检测表明gIL-18基因和VP1基因同时在同一细胞中独立表达。将共表达产物进行生物学活性分析表明,重组蛋白能够诱导山羊脾淋巴细胞生成IFN-γ抑制水疱性口炎病毒(VSV)在牛肾细胞(MDBK)上生长。本试验用Bac-to-Bac系统成功构建了同时含有gIL-18基因和VP1基因的重组杆状病毒,并在昆虫细胞中得到了高效表达,且具有良好的生物学活性,从而为下一步研究gIL-18在口蹄疫(FMD)中的免疫调节作用奠定了坚实的基础。
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| 关 键 词： | 口蹄疫 VP1基因 山羊白细胞介素18基因 共表达 sf9细胞 |
Coexpression and identified bioactivity of VP1 gene of FMDV type O and goat IL-18 gene in sf9 cells |
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| WANG Ting-ting,FAN Zhong-ling,WANG Xi-hui,CHEN Jin-long,CAO Bing-lei,KONG Na,HU Jing-dong,ZHAO Hong-kun.Coexpression and identified bioactivity of VP1 gene of FMDV type O and goat IL-18 gene in sf9 cells[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(2). |
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| Authors: | WANG Ting-ting FAN Zhong-ling WANG Xi-hui CHEN Jin-long CAO Bing-lei KONG Na HU Jing-dong ZHAO Hong-kun |
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| Institution: | WANG Ting-ting1,FAN Zhong-ling1,WANG Xi-hui1,CHEN Jin-long1,CAO Bing-lei1,KONG Na1,HU Jing-dong1,ZHAO Hong-kun1,2 |
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| Abstract: | The VP1 gene of foot-and-mouth disease virus(FMDV) type O and goat interleukin-18(gIL-18) gene were inserted into the downstreams of P10 promoter and PH promoter of baculovirus expression plasmid pFastBacTM Dual,respectively.Then the constructing eukaryotic expression plasmid pFastBacTM Dual-gIL18-VP1 was transformed into DH10Bac,and screened by three antibiotics and blue-white patch.Finally,the recombinant Bacmid-gIL18-VP1 was transfected into Sf9 insect cells.The coexpression of gIL-18 and VP1 protein in ... |
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| Keywords: | FMD VP1 gene goat interleukin-18 gene coexpression sf9 cells |
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