| 猪链球菌通用型和2型双重荧光定量PCR快速检测技术的建立和应用 |
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| 引用本文： | 吴静波,南文金,黄健强,胡鸿惠,彭国良,彭凌,董小英.猪链球菌通用型和2型双重荧光定量PCR快速检测技术的建立和应用[J].畜牧兽医学报,2018(2). |
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| 作者姓名： | 吴静波 南文金 黄健强 胡鸿惠 彭国良 彭凌 董小英 |
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| 作者单位： | 韶关学院粤北生猪生产及疫病防控协同创新发展中心; |
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| 摘 要： | 为快速区分检测猪链球菌血清型2型和其他血清型,以猪链球菌的保守基因gdh和2型特异性基因cps2J为靶基因设计引物和TaqMan探针,建立猪链球菌通用型和2型特异性的双重荧光定量PCR检测方法,并与常规PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示:本方法在1.5h内可完成猪链球菌和2型猪链球菌同时检测,与其他细菌无交叉反应;检测灵敏度可达5拷贝数,标准曲线相关系数大于0.999,批内和批间CV均小于1.25%。对67份临床样品检测显示猪链球菌和2型猪链球菌检出率分别为79.1%和35.8%,与常规PCR检测结果的符合率为92.5%和89.6%,kappa值为0.800和0.757,具有极好的一致性。成功建立了灵敏、特异和稳定的双重荧光定量PCR方法,实现了猪链球菌和2型猪链球菌同时及快速诊断。
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