| 鸭坦布苏病毒SYBR Green qPCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 陈国强,李永旺,王凯民,陈雷,钱伟,朱婷,陆春华,时长军.鸭坦布苏病毒SYBR Green qPCR检测方法的建立[J].畜牧与兽医,2018(9). |
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| 作者姓名： | 陈国强 李永旺 王凯民 陈雷 钱伟 朱婷 陆春华 时长军 |
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| 作者单位： | 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室;苏州出入境检验检疫局;苏州西山生物技术有限公司;江苏出入境检验检疫局 |
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| 摘 要： | 通过BLAST比较已公布的鸭坦布苏病毒核酸序列,在其E基因保守区域设计了4对引物,并用鸭坦布苏病毒培养物核酸筛选出最佳的一对引物建立了SYBR Green qPCR。用构建的重组质粒建立标准曲线,扩增效率为90.5%,在2.0×10~1~2.0×10~8copies/μL范围内具有良好的线性关系,最低检测限为100拷贝/反应。该qPCR方法可以检测5个鸭坦布苏病毒分离株以及WF100活疫苗,灵敏性比文献已发表的其他3对引物高10倍;且特异性很好,不与其他常见禽类病毒交叉反应。由此表明本研究新建了一种高度灵敏和特异的鸭坦布苏病毒的SYBR Green qPCR检测方法。
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