| 流行性出血病多克隆抗体C-ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 朱建波,杨振兴,肖雷,高林,苗海生,何于雯,孟锦昕,杨恒,李华春.流行性出血病多克隆抗体C-ELISA检测方法的建立[J].畜牧兽医学报,2018(7). |
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| 作者姓名： | 朱建波 杨振兴 肖雷 高林 苗海生 何于雯 孟锦昕 杨恒 李华春 |
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| 作者单位： | 云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室 |
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| 摘 要： | 为能简便、快速地进行流行性出血病病毒(epizootic haemorrhagic disease virus,EHDV)抗体监测,采用纯化的6型EHDV抗原包被ELISA板,以豚鼠抗EHDV-2型多克隆抗体作为竞争抗体,建立了检测EHDV群特异性抗体的竞争ELISA(C-ELISA)方法。结果显示:抗原最佳包被浓度为5.12μg·mL-1(1∶10 000),竞争抗体最佳稀释倍数为1∶10 000;通过对各270份阴性和阳性的牛、羊血清检测,确定该检测方法临界值为50%;特异性试验表明该ELISA方法仅能检测出不同血清型EHDV抗体,具有较好的群特异性;对已知抗体效价的阳性血清检测表明,建立的C-ELISA方法敏感性好于血清中和试验(SNT)和琼脂扩散试验(AGID);分别用C-ELISA、SNT、RTPCR和病毒分离试验对监控动物采集的血清和抗凝血样品进行检测,ELISA结果与其他3种方法检测结果对应一致。结果表明本研究建立的C-ELISA为EHDV抗体的检测提供了一种快速、敏感、稳定的方法。
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