猪流行性腹泻病毒中和表位区S1D的原核表达及免疫原性分析 |
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引用本文: | 张鸿鑫,韩昊莹,侯华琳,赵宇,郑兰兰,杨明凡,陈红英.猪流行性腹泻病毒中和表位区S1D的原核表达及免疫原性分析[J].畜牧与兽医,2018(10). |
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作者姓名: | 张鸿鑫 韩昊莹 侯华琳 赵宇 郑兰兰 杨明凡 陈红英 |
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作者单位: | 河南农业大学牧医工程学院;郑州市猪重大疫病防控重点实验室 |
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摘 要: | 为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)S1蛋白中和表位区S1D的免疫原性,根据PEDV河南株(Gen Bank:YK649107)S1基因序列,设计1对特异性引物,PCR扩增S1D片段,克隆到p ET-28a(+)中,构建原核表达载体,经优化的IPTG浓度诱导后进行SDS-PAGE分析,利用His标签的特性重组蛋白进行纯化及Western blot分析。结果显示:中和表位S1D片段在p ET-28a(+)中高效表达;Western blot证明重组蛋白可以与PEDV阳性血清产生特异性反应;用纯化的蛋白免疫新西兰白兔,抗体水平升高,表明重组蛋白具有良好的免疫原性。
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