| 利用qRT-PCR技术对PVY重组株系的鉴定 |
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| 引用本文： | 尚慧,韩树鑫,高艳玲,张威,范国权,申宇,聂先舟,吕文河,白艳菊.利用qRT-PCR技术对PVY重组株系的鉴定[J].西南农业学报,2018(2). |
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| 作者姓名： | 尚慧 韩树鑫 高艳玲 张威 范国权 申宇 聂先舟 吕文河 白艳菊 |
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| 作者单位： | 东北农业大学农学院;黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所;加拿大农业部马铃薯研究中心;黑龙江省农业科学院克山分院; |
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| 摘 要： | 【目的】马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)作为制约马铃薯生产的重要病毒之一,株系分化繁杂。近年被科学家研究分离的PVY~(N-Wi)和PVY~(NTN-NW)株系而言,其基因组结构极为相似但致病性差异较大。【方法】本研究利用qRT-PCR方法,方便快捷的检测出马铃薯Y病毒的这2种不同株系,同时并使之可成功且稳定的应用于马铃薯生产中。通过查找Gen Bank已公布的PVY~(N-Wi)和PVY~(NTN-NW)株系的全基因组序列,设计用于qRT-PCR检测,扩增目的片段大小为150 bp左右的特异性引物,应用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)进行检测。【结果】通过设计的引物对保存的试管苗毒源进行检测,可以成功的精准鉴别出PVY~(N-Wi)和PVY~(NTN-NW)株系;同时对100份田间采集的叶片样品进行检测,成功的检测出100份样品中32份样品,受到PVY~(N-Wi)株系侵染;27份样品,受到PVY~(NTN-NW)株系侵染;同时存在9份样品,可能同时受到PVY~(N-Wi)、PVY~(NTN-NW)株系的侵染。【结论】实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)可适用于马铃薯叶片样品的检测,为株系的快速鉴定提供了可靠的方法,可用于生产中大规模样品的检测,有利于及时采取防控措施,降低损失。
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