| 利用CRISPR/Cas9系统敲除绵羊皮肤成纤维细胞Wnt2基因的研究 |
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| 引用本文： | 冯新宇,袁超,郭婷婷,刘建斌,郭健,牛春娥,孙晓萍,冯瑞林,岳耀敬,杨博辉.利用CRISPR/Cas9系统敲除绵羊皮肤成纤维细胞Wnt2基因的研究[J].畜牧与兽医,2018(2):52-55. |
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| 作者姓名： | 冯新宇 袁超 郭婷婷 刘建斌 郭健 牛春娥 孙晓萍 冯瑞林 岳耀敬 杨博辉 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院羊育种工程技术研究中心/中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所; |
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| 摘 要： | 为了研究无翅基因相关整合位点2(Wnt2)在绵羊毛囊发育中的作用,通过CRISPR/Cas9系统介导的基因编辑技术在绵羊原代皮肤成纤维细胞中敲除Wnt2基因,经T7E1酶切试验进行敲除结果验证,实时荧光定量PCR分析Wnt2、E-钙黏蛋白(CDH1)、半光天冬氨酸酶3(Caspase3)和成纤维细胞生长因子5(FGF5)在敲除后的表达量变化。结果显示:绵羊原代皮肤成纤维细胞中Wnt2基因敲除成功,编辑效率约14.35%;Wnt2相对表达量极显著下调(P0.01),CDH1相对表达量极显著上调(P0.01),Caspase3及FGF5表达上调显著(P0.05)。结果表明:Wnt2基因对毛囊的生长发育具有促进作用。
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| 关 键 词： | 无翅基因相关整合位点2 毛囊 CRISPR/Cas9 RT-PCR |
Knockout of Wnt2 in the primary cell of sheep skin fibroblast via the CRISPR/Cas9 system |
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