| 表达PRRSV GP2a/GP2b、GP3、GP4、GP5和M蛋白重组腺病毒的构建 |
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| 引用本文： | 陈振海,林天龙,俞伏松,宋铁英,龚晖,方勤美,杨金先.表达PRRSV GP2a/GP2b、GP3、GP4、GP5和M蛋白重组腺病毒的构建[J].福建农业学报,2007,22(3):221-226. |
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| 作者姓名： | 陈振海 林天龙 俞伏松 宋铁英 龚晖 方勤美 杨金先 |
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| 作者单位： | 1. 福建省农业科学院生物技术研究所,福建,福州,350003;福建省畜禽疫病防治工程技术中心,福建,福州,350013
2. 福建省农业科学院生物技术研究所,福建,福州,350003 |
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| 摘 要： | 以PRRSV FJ-1a株为模板,采用RT-PCR法分别扩增出GP2a/GP2b-3、GP3、GP4、GP5和M蛋白基因片段,双酶切后插入穿梭质粒pDC316.利用AdMaxTM法,将5个重组穿梭质粒分别与腺病毒辅助质粒共转染293细胞,得到重组腺病毒Ad-GP2a/GP2b-3、Ad-GP3、Ad-GP4、Ad-GP5和Ad-M.重组腺病毒滴度为107.7～109.0TCID50·mL-1,而以Ad-GP5滴度最低,仅为107.7TCID50·mL-1.PCR检测第3、6、9代重组腺病毒稳定性,确证重组病毒均能稳定携带目的基因.对目的基因转录的RT-PCR鉴定结果显示,重组腺病毒分别感染293细胞后能转录产生目的基因mRNA.表达PRRSV主要囊膜蛋白基因重组腺病毒的获得,为进一步研制PRRSV基因工程疫苗,解析主要囊膜蛋白功能奠定基础.
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 重组腺病毒 囊膜蛋白 |
| 文章编号： | 1008-0384(2007)03-0221-06 |
| 收稿时间： | 2007-07-20 |
| 修稿时间： | 2007-08-13 |
Establishment of recombinant adenoviruses for expressing PRRSV GP2a/GP2b, GP3, GP4, GP5, and M proteins |
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| CHEN Zhen-hai,LIN Tian-long,YU Fu-song,SONG Tie-ying,GONG Hui,FANG Qin-mei,YANG Jin-xian.Establishment of recombinant adenoviruses for expressing PRRSV GP2a/GP2b, GP3, GP4, GP5, and M proteins[J].Fujian Journal of Agricultural Sciences,2007,22(3):221-226. |
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| Authors: | CHEN Zhen-hai LIN Tian-long YU Fu-song SONG Tie-ying GONG Hui FANG Qin-mei YANG Jin-xian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PRRSV recombinant adenovirus envelope protein |
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