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| 二化螟鞘磷脂合酶相关基因CsSMSr的克隆、真核表达及表达谱分析 | |
| 引用本文： | 张艳茹,郑作林,周瀛,杨琼,巩中军,程家安,祝增荣.二化螟鞘磷脂合酶相关基因CsSMSr的克隆、真核表达及表达谱分析[J].核农学报,2013,27(1). |
| 作者姓名： | 张艳茹 郑作林 周瀛 杨琼 巩中军 程家安 祝增荣 |
| 作者单位： | 1. 水稻生物学国家重点实验室,浙江杭州310058;浙江大学昆虫科学研究所,浙江杭州310058;农业部农业昆虫学重点开放实验室,浙江杭州310058 2. 水稻生物学国家重点实验室,浙江杭州310058;浙江大学昆虫科学研究所,浙江杭州310058;农业部农业昆虫学重点开放实验室,浙江杭州310058;江苏省农业科学院植物保护研究所,江苏南京210014 3. 水稻生物学国家重点实验室,浙江杭州310058;浙江大学昆虫科学研究所,浙江杭州310058;农业部农业昆虫学重点开放实验室,浙江杭州310058;河南省农业科学院植物保护研究所,河南郑州450002 |
| 摘 要： | 鞘磷脂合酶(SMS)基因家族在鞘脂质代谢中起着关键作用,可以通过调节神经酰胺和甘油二酯的平衡调控细胞的生存和凋亡.本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆得到1个二化螟鞘磷脂合酶相关基因的全长eDNA,命名为CsSMSr(Genbank登录号:JQ664739).CsSMSr开放阅读框1587bp,可编码528个氨基酸；序列分析表明,CsSMSr基因编码的蛋白N端具有保守的SAM结构域,含6个跨膜区域,并且有4个SMS家族特有的保守区域D1～D4,保守区D3和D4上有活性中心包括3个氨基酸残基(催化三联体):His302,His345,Asp349.CsSMSr在粉纹夜蛾Tn细胞内成功表达,Western blot检测表达产物分子量约60kDa.应用实时荧光定量PCR方法分析该基因在二化螟不同发育阶段和不同组织的表达,结果表明,CsSMSr随着二化螟的生长发育表达水平逐渐升高,在成虫时期达到最大；CsSMSr的表达具有组织特异性,二化螟雌成虫和雄幼虫生殖器官中的CsSMSr表达量都显著高于其他器官,在二化螟雄成虫精巢中表达量也较高,但与中肠和马氏管差异不大.CsSMSr的表达有时间特异性和组织特异性,推测该基因在二化螟的发育和生殖中有重要作用.本研究成功克隆并表达了二化螟鞘磷脂合酶相关基因,为进一步对该基因进行功能鉴定奠定了基础. |
| 关 键 词： | 二化螟 鞘脂质 鞘磷脂合酶相关基因 真核表达 实时荧光定量PCR |
CLONING, EUKARYOTIC EXPRESSION AND EXPRESSION PATTERN OF SPHINGOMYELIN SYNTHASE-RELATED GENE (CsSMSr)FROM Chilo Suppressalis (WALKER) |
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