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家兔早孕因子原核表达及重组蛋白的纯化、复性与鉴定
引用本文:杨杰,张海涛,翟频,白文霞,潘孝青,邵乐.家兔早孕因子原核表达及重组蛋白的纯化、复性与鉴定[J].江苏农业科学,2011,39(6).
作者姓名:杨杰  张海涛  翟频  白文霞  潘孝青  邵乐
作者单位:1. 江苏省农业科学院畜牧研究所,江苏南京,210014
2. 南京天邦生物科技有限公司,江苏南京,211102
3. 南京工业大学江苏省药物安全性评价中心,江苏南京,210009
基金项目:江苏省农业科学院基金,江苏省高技术(农业)研究计划,江苏省农业三项工程
摘    要:通过已构建的含家兔早孕蛋白因子(EPF)基因的重组表达质粒,转化大肠杆菌Rosseta( DE3),在IPTG诱导下表达硫氧还原蛋白-家兔早孕因子融合蛋白( Trx - EPF).结果显示蛋白表达量占菌体总蛋白的30%左右.重组家兔早孕因子融合蛋白(Trx-EPF)经过Ni2+柱纯化、柱上复性,浓缩以后溶液中蛋白浓度达到10 mg/mL,复性率达到13.1%.SDS - PAGE及Western Blot分析表明,在分子量30 ku左右处有一特异性蛋白条带.

关 键 词:早孕因子  家兔  原核表达  蛋白纯化
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