| 枣疯病植原体TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 韩剑,罗明,徐金虹,王同仁,张祥林.枣疯病植原体TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].植物保护,2014,40(5):111-116. |
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| 作者姓名： | 韩剑 罗明 徐金虹 王同仁 张祥林 |
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| 作者单位： | 1. 新疆农业大学农学院, 乌鲁木齐 830052; 2. 新疆阿瓦提县农技推广中心, 阿瓦提 843200; 3. 新疆出入境检验检疫局, 乌鲁木齐 830063 |
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| 基金项目： | 新疆维吾尔自治区高校科研计划项目(XJEDU2010S15); 新疆维吾尔自治区自然科学基金(2010211A17); 质检公益性行业科研专项(201310091) |
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| 摘 要： | 根据枣疯病植原体16S rDNA基因保守区域设计、合成特异性引物和TaqMan探针, 以构建的重组质粒作为阳性标准品, 建立并优化了对枣疯病植原体的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。对优化后的方法进行灵敏度、特异性及稳定性评价, 制作了标准曲线。结果显示, 制作的标准曲线有极好的线性关系, 相关系数( r 2 )达到0.998, 建立的实时荧光定量PCR检测方法能够特异性地检测枣疯病植原体, 能检测到60拷贝的质粒DNA。本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法灵敏度、特异性、重复性好, 不仅能够实现对枣疯病植原体的快速检测, 而且为实现从病原定量水平上对枣疯病病情分级奠定了基础。
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| 关 键 词： | 枣疯病植原体 TaqMan探针 实时荧光定量PCR 检测 |
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