| 鸡白痢沙门氏菌invA基因的克隆与原核表达 |
| |
| 引用本文： | 刘志科,张秋雨,杨宁宁,等.鸡白痢沙门氏菌invA基因的克隆与原核表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2018,46(8):9-15. |
| |
| 作者姓名： | 刘志科 张秋雨 杨宁宁 等 |
| |
| 作者单位： | 石河子大学动物科技学院;河南科技学院动物科学学院;石河子大学生命科学学院;石河子大学医学院 |
| |
| 基金项目： | 西部地区高发人兽共患传染性疾病防治项目(2013-179) |
| |
| 摘 要： | 【目的】克隆鸡白痢沙门氏菌侵袭蛋白A(invA)基因并进行原核表达,分析重组蛋白invA的抗原性,为沙门氏菌快速诊断试纸条和新型表位疫苗的研发提供理论依据。【方法】以鸡白痢沙门氏菌野毒株为供试菌,克隆其invA基因,对invA基因编码的蛋白进行生物信息学分析。将invA基因克隆到pET-30a原核表达载体上,构建原核重组表达质粒pET-30a-invA,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析,检测其目的蛋白的表达情况和免疫反应特性。【结果】成功获得了1 143bp的完整的invA基因,编码381个氨基酸。生物信息学分析结果表明,invA基因编码的蛋白有17个抗原决定簇,其跨膜区域明显,92-105位氨基酸为low complexity典型结构域。构建获得了原核重组表达质粒pET-30a-invA,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了约51ku的invA融合蛋白;Western-blot检测结果显示,该融合蛋白具有良好的免疫反应性。【结论】成功克隆出了1 143bp大小invA基因,明确了其编码蛋白的生物信息,其诱导表达后获得免疫反应性良好的重组蛋白。
|
| 关 键 词： | 鸡白痢沙门氏菌 invA基因 原核表达 生物信息学分析 免疫反应性 |
| 收稿时间： | 2017/5/12 0:00:00 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》下载免费的PDF全文 |
|
