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鸭瘟病毒抗体间接ELISA检测试剂盒的研制
引用本文:齐雪峰,程安春,汪铭书,杨晓燕,贾仁勇,陈孝跃.鸭瘟病毒抗体间接ELISA检测试剂盒的研制[J].中国兽医科技,2007,37(8):690-694.
作者姓名:齐雪峰  程安春  汪铭书  杨晓燕  贾仁勇  陈孝跃
作者单位:[1]四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川雅安625014 [2]动物疾病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014 [3]大理学院生命科学与化学院,云南大理671000
基金项目:国家科技攻关重大项目(2004BA901A03);教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-04-0906);教育部高等学校科技创新工程重大项目(706050);四川省杰出青年科学带头人基金后续资助项目(03ZQ026-028);四川省重点建设学科项目(SZD0418);国家农业科技成果转化资金项目(2006GB2F000249).
摘    要:将鸭瘟病毒(DPV)CHv株经过鸭胚成纤维细胞增殖、反复冻融、差速离心和蔗糖密度介质离心制备纯化抗原,建立了用于检测鸭血清中抗DPV特异性IgG抗体的间接ELISA方法,并对其进行了标准化研究,确定了最佳工作条件,研制了相应的检测试剂盒并对盒内各组分的保存条件、质量控制以及试剂盒的特异性、重复性进行了研究。结果显示,4.75μg/孔的纯化DPV抗原包被反应板可获得良好的特异性和敏感性,1∶100稀释的待检血清样品反应后D405 nm值换算为抗体效价的标准直线方程为y=1.573+3.552x(r=0.953,n=40)。试剂盒在4℃保存3个月或-20℃保存10个月后各项性能都很好。应用该试剂盒对皮下注射、口服和滴鼻免疫DPV弱毒的20日龄樱桃谷鸭血液中抗DPV特异性IgG抗体效价进行了测定,皮下免疫鸭于第6 d,口服和滴鼻免疫鸭于第9 d可在血清中检测到DPV特异性抗体,且至第60 d时依然可检测到高效价抗体。证实,该试剂盒可用于鸭瘟的血清流行病学调查和鸭场免疫抗体水平的监测。

关 键 词:鸭瘟病毒抗体  间接ELISA  试剂盒
文章编号:1673-4696(2007)08-0690-05
收稿时间:2007-03-26
修稿时间:2007-05-29

Development of an indirect-ELISA kit for detection of antibodies against duck plague virus
QI Xue-feng ,CHENG An-chun ,WANG Ming-shu ,YANG Xiao-yan,JIA Ren-yong ,CHEN Xiao-yue.Development of an indirect-ELISA kit for detection of antibodies against duck plague virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2007,37(8):690-694.
Authors:QI Xue-feng  CHENG An-chun  WANG Ming-shu  YANG Xiao-yan  JIA Ren-yong  CHEN Xiao-yue
Abstract:
Keywords:
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