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猪生殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白nsp4基因的表达及其产物的纯化
引用本文:胡涛,才学鹏.猪生殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白nsp4基因的表达及其产物的纯化[J].中国兽医科技,2006,36(9):687-691.
作者姓名:胡涛  才学鹏
作者单位:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃兰州730046
摘    要:根据GenBank中已登录的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,对PRRSV非结构蛋白nsp4基因进行了RT-PCR扩增,将回收的目的基因片段克隆到大肠埃希氏菌表达载体pET28a中,构建了重组质粒pET-nsp4,测序结果证实了重组质粒pET-nsp4的可靠性。将pET-nsp4转化至大肠埃希氏菌表达菌株BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果表明,重组菌可表达分子质量约23ku的蛋白。经镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)纯化,获得了高纯度的重组蛋白,Western-blot分析结果表明,nsp4重组蛋白在大肠埃希氏菌系统中获得了正确表达。

关 键 词:猪生殖与呼吸综合征病毒  nsp4基因  表达  纯化
文章编号:1673-4696(2006)09-0687-05
收稿时间:2006-03-17
修稿时间:2006-08-15

Expression and product purification of the nonstructural protein 4 gene of porcine reproductive and respiratory syndrome virus
HU Tao, CAI Xue-peng.Expression and product purification of the nonstructural protein 4 gene of porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2006,36(9):687-691.
Authors:HU Tao  CAI Xue-peng
Abstract:
Keywords:PRRSV  nsp4 gene  expression  purification
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